关于墨西哥丽脂鲤的研究.pptVIP

实验结果显示：移植了地表种眼原基的洞穴鱼胚胎的眼睛并不退化，并且继续生长，视网膜和感光细胞也正常分化，角膜、睫状体以及虹膜也会按时发生，巩膜也会正常僵化，所有特征都显示与正常的地表种眼睛发育一样。相反，被移植了洞穴鱼眼原基的地表种胚胎眼睛发育变得迟缓，开始细胞凋亡，最终被身体其它组织淹没。 最终结果是被移植的一侧都显示出完全不同的表现型，地表种被移植的一侧显出眼部缺失的现象，洞穴种被移植的一侧则发育出了完整的眼。 第二十一页，共43页。 如图所示：移植实验的结果 A图所示是洞穴鱼的正常一侧，B图所示是被移植地表鱼眼原基的一侧。 E图所示是地表鱼正常的一侧，F图所示是被移植洞穴鱼眼原基的一侧。 第二十二页，共43页。 因为晶状体的发育是自主的，这些结果说明晶状体细胞凋亡是眼睛退化的主要原因。 在地表鱼的发育期间，晶状体产生一种信号导致眼睛一步步发育和分化，在洞穴鱼中可能是这种信号的缺失导致眼部退化。 实验结果也说明洞穴鱼的晶状体凋亡是早就预设的，至少是在移植前就已经预设好了。 第二十三页，共43页。 基因表达模式的研究 对于基因的研究，首先是采用显示分析表达的DNA序列的差异，然后通过微芯片比较地表鱼和洞穴鱼的转录本的差异，令人意外的是，两种结果都显示洞穴鱼的很多基因表达水平要高于地表鱼。这个结果使得一些学者提出的洞穴鱼的眼睛退化是为了减少能量损耗的理论失去了证据。 最新的研究方法是先比较候选基因（筛选出对眼睛发育有重要作用的基因），目前已经比较了包括转录因子、编码蛋白质的结构基因等150多个个体的基因。 后面将详细讨论个别基因的表达模式。 第二十四页，共43页。 原位杂交检测的结果显示大多数基因的表达模式并没有显著的变化，例如，在洞穴鱼的晶状体和视网膜中，转录因子Prox1的表达是正常的。视蛋白基因在洞穴鱼中也是正常表达的。这些结果显示了，在洞穴鱼类的眼睛发育中，功能基因甚至包括控制区的结构基因的功能是不会发生改变的。 但是，在洞穴鱼中，有一些基因有着特殊的表达模式。 一个基因具有Hsp90α分子伴侣，正常情况下在洞穴鱼和地表鱼中都会表达。然而，当洞穴鱼开始进行细胞凋亡时，它的表达异常活跃。研究显示，当它的表达被抑制后，洞穴鱼的细胞凋亡也会停止，视网膜会在一定程度上恢复分化。这个结果说明Hsp90α的活化作用是洞穴鱼眼部退化和晶状体细胞凋亡的必需条件。但是具体作用还不清楚。 第二十五页，共43页。 K图所显示的是地表鱼胚胎眼部截面中hsp90α的表达区域 L图显示的是同一时期洞穴鱼胚胎眼部截面hsp90α的表达区域。可以看出在洞穴鱼中，hsp90α的表达要活跃的多。 第二十六页，共43页。 在脊椎动物包括斑马鱼的神经胚时期，pax6会在晶状体基板和视泡原基中表达，可见pax6编码的转录因子在调节眼部发育中有着非常重要的作用。眼泡的结构有视杯和视柄两个部分组成，这两个部分分别受到pax6和pax2的调节作用。Pax6作用于视杯的发育，而pax2控制视柄的发育。推测这两个转录因子之间有着拮抗作用。这就能够解释杰弗里教授曾经观察到的，在洞穴鱼的眼部发育中，视杯缺失后，能在腹侧形成更大的视柄区域这一现象。 第二十七页，共43页。 山本等人发现，在洞穴鱼的眼部发育中，pax6的表达模式相对于地表鱼果然是有着细微的变化。第一，在洞穴鱼的晶状体基板中，pax6的表达有所减少；其次，对比地表鱼和洞穴鱼的pax6的表达区域，洞穴鱼的相对更小。这表明在洞穴鱼的胚胎中，pax6基因的表达模式有所缓和。 与之相应的是pax2的表达模式的改变，在最近几年的研究中，山本等人发现pax2a在洞穴鱼胚胎中的表达区域在尺寸上有所增加。 因此推测，洞穴鱼眼睛退化的机制之一是pax6和pax2的相互作用导致视泡结构改变。 第二十八页，共43页。 从图上能更加清楚的看到这种改变 E图显示的是地表鱼pax6的表达区域，F图显示的则是洞穴鱼的表达区域。 G和H是从另一个切面看pax2a的表达区域。Pax2a的表达区域在视泡（optic vesicles）基部。 第二十九页，共43页。 Hedenhog 信号的重要作用 对于脊椎动物的眼睛发育过程，还有一个设想，假定视杯最初形成于中间的信号区域，然后被胚胎中间出现的Hh信号分开，形成两部分，继而发育成两个眼睛。因此，在正常的眼睛发育过程中，Hh信号阻断pax6在中间区域的表达，是形成两边正常眼睛的必要条件。支持这一论断根据是，在人类和小鼠身上，Shh（脊椎动物体内的Hh信号基因）的突变会导致独眼畸形，即在中间位置发育成一只单独的眼。 第三十页，共43页。 在硬骨鱼中，有两个Hh信号基因：Shh和twhh,这两个基因有重叠的表达模式，因此在硬骨鱼中，这两个基因的正常表达可能是两边眼睛完全分开的必要条件。 详细对比洞穴鱼和地