食品毒理学第6章.ppt

第六章 一般毒性作用;§6-1 急性毒性作用 ;二、急性毒性试验的目的 1. 测试并求出毒物的的致死剂量以及其他急性毒性 参数，通常以LD50为最主要参数，并根据LD50的 大小进行急性毒性分级。 2. 通过观察动物的表现、毒作用强度和死亡情况， 初步评价毒物对机体的毒效应特征、靶器官、剂 量－反应关系和对人体产生损害的危险性。 3. 为亚慢性、慢性毒性试验研究以及其他毒理试验 提供接触剂量和观察指标选择的依据。 4. 为毒理学机制研究提供线索。;三、急性毒??试验方法要点1．实验动物的选择;①尽量选择对化学毒物的代谢和毒效应表现 与人的反应尽可能一致的实验动物； ②易于饲养管理、试验操作方便的动物； ③繁殖生育力较强、数量较大能够保障供应； ④价格较低，易于获得。;①实验动物的物种和品系 首选哺乳动物，大小鼠最为常用。 大鼠：Spragur-Dawley（SD），Wistar 小鼠：昆明种，NIH，ICR ②实验动物的年龄和体重：刚成年，且健康、未曾 交配和受孕的动物。 大鼠：180～240克 小鼠：18～25克 同一次试验、同一批实验动物的体重变异范 围不得超过其平均体重的20％。 ;③常用剂型： 水溶液；混悬液；油溶液。 ④试验前新鲜配制。 ⑤受试物染毒量规定： 小鼠0.2ml/10g，一次灌胃体积不超过1.0ml/只 大鼠1.0ml/100g，一次灌胃体积不超过5ml/只 3．染毒方法 灌胃;4．剂量选择与分组 5．毒性作用观察 ①中毒体征及发生过程； ②死亡情况和时间分布； ③体重； ④病理检查。 6．观察时间和周期 观察时间：染毒当天应连续或多次观察，以 后每天2次或多次观察直至试验结束。 观察周期：一般是14天。 7. 计算LD50;(1)查阅文献 ①了解化学毒物的理化特性，生产批号及纯 度，杂质成分与含量等。 ②确定使用哪一种计算方法求LD50，然后再设计剂 量分组。 LD50的计算方法常用寇氏法、概率单位法、霍恩氏法等。 ③找出与受试化学毒物结构与理化性质近似的化学 物的毒性资料，并以文献资料中相同的动物种系 和相同接触途径所测得的LD50值作为受试化学物的 预期毒性中值。;（2）预试验 ①设定以此预期值作为待测化学物的中间剂量组， 并在该剂量的上下各设计l～2个剂量组作为预 试验剂量。 ②根据确定的剂量组进行染毒。 ③根据预试验的死亡资料确定组距。 可根据以下公式计算出剂量分组： i=(lgLD90-lgLD10)／(n-1) 或：i=(lgLD100-lgLD0)／(n-1) 式中i为组距(相邻的两个剂量组对数剂量之差)； n为设计的剂量组数。;（3）正式试验 根据试验设计所选用的LD50计算方法来确定组数。 例如，几率单位法、寇氏法一般设5～10个剂量组； 霍恩氏法固定设4个剂量组。 求得i值后，以最低剂量组(LD0或LD10)的对数剂量 加上一个i值，即是第二个剂量组的对数剂量，依 此类推直至最高剂量组，查各自的反对数即得出各 组剂量的真实值。 1 2 3 4 5 6 LgLD0 LgLD0+i LgLD0+2i LgLD0+3i LgLD0+4i ???;;死亡和死亡时间 重点观察和记录每只动物死亡的时间，特 别是最早出现死亡的时间以及各个剂量组 动物的死亡数。;体重 在观察试验动物中毒症状的过程中，应同时观察 体重的变化。 体重可以反映动物中毒后的整体变化。 体重改变的原因很多： *若化学毒物刺激或损伤消化道可出现试验动物饮食减少 甚至拒食，表现为体重减轻； *若化学毒物引起腹泻，将影响食物吸收和利用，体重也 会减轻； *如果化学毒物影响水的摄取或肾功能急性损伤，也可能 在体重上反映出来。;寇氏法（Karbor） ;①剂量确定：在LD0与LD100之间按等比级数 插入几个中间剂量组。相邻剂量公比，按下式 计算：i= (lgLD100-lgLD0)／(n-1) （1） n为欲分组数； 则各组剂量分别为下列各数值的反对数： lgLD0 lgLD0+i lgLD0+2i lgLD0+3i lgLD0+4i ........。 设通过预试验，求得普鲁卡因的lgLD0为164mg/kg, lgLD100为250mg/kg，准备分成5组进行实验，各组 剂量为多少？ 将以上数据代入公式（1）：i=0.046 故各组剂量分别为164，182，203，225，250mg/kg;②给药及观察