医学免疫学课件-免疫学检测技术.ppt

* * * * * * * * * * * 3.放射免疫技术 将同位素分析的高灵敏度与抗原抗体反应的特异性相结合，以放射性同位素作为示踪物的标记免疫测定方法。具有重复性好、准确性高等优点，敏感性可达到pg/ml水平。 三、检测抗原和抗体的体外试验 4.发光免疫分析 化学发光免疫测定 生物发光免疫测定 化学发光酶免疫测定 电化学发光免疫测定 三、检测抗原和抗体的体外试验 5.胶体金技术 胶体金在免疫组化中应用 胶体金免疫层析快速诊断技术 三、检测抗原和抗体的体外试验 2 第二节 免疫细胞功能的检测 一、免疫细胞的分离 1.外周血单个核细胞的分离 2.淋巴细胞及其亚群的分离 免疫吸附分离法 免疫磁珠分离法 荧光激活细胞分选仪（FACS） 抗原肽-MHC分子四聚体技术 流式细胞仪工作原理 一、免疫细胞的分离 （一）T细胞功能测定 （二）B细胞功能测定 （四）吞噬功能测定 （五）细胞因子的检测 （三）细胞毒试验 二、免疫细胞功能的测定 （一）T细胞功能的测定 1.细胞增殖试验 形态计数法 3H-TdR或125I-UdR掺入法 MTT比色法 2.迟发型超敏反应的检测 二、免疫细胞功能的测定 （二）B细胞功能的测定 1.Ig的含量检测 2.抗体形成细胞检测 二、免疫细胞功能的测定 （三）细胞毒试验 1.51Cr释放法 2.乳酸脱氢酶释放法 3.细胞染色法 4.凋亡细胞检测法 形态学检测法 琼脂凝胶电泳法 FACS TUNEL法 二、免疫细胞功能的测定 （四）吞噬功能测定 1.硝基蓝四氨唑试验 2.巨噬细胞吞噬试验 二、免疫细胞功能的测定 01 02 03 细胞增殖或增殖抑制法 细胞病变抑制法 ELISA 胞内细胞因子检测法 ELISPOT Im-PCR 生物活性检测法 免疫学检测法 分子生物学技术检测法 （五）细胞因子的检测 二、免疫细胞功能的测定 ELISPOT示意图 二、免疫细胞功能的测定 体外进行抗原抗体检测的基本原理是抗原抗体的结合具有高度特异性，据此可用已知的抗原抗体检测未知的抗原抗体。体外抗原抗体反应的方法很多，其中，免疫标记技术因为具有可定性、定量和敏感性更高等优点而被广泛应用。对免疫细胞可进行体外分离和鉴定，如检测不同的细胞群、亚群，对细胞进行计数检测和功能评价等，其检测结果可为临床疾病诊断和治疗提供有价值的信息。 谢谢观看 * * * * * * * * * * * * * * * * * 单击此处推荐文章标题 第二十四章 免疫学检测技术 作者：张红军 单位：牡丹江医学院 掌握凝集反应、沉淀反应、免疫标记技术的基本原理，掌握免疫细胞及其亚群分离和功能检测的方法和原理。 熟悉抗原抗体反应的特点和影响因素。 了解吞噬细胞功能检测的常用方法与原理。 学习目标 * 第一节 抗原抗体反应相关检测技术 第二节 免疫细胞功能的检测 目录 1 第一节 抗原抗体反应相关检测技术 一、抗原抗体反应特点 1.高度特异性 2.表面化学基团之间的可逆结合 3.适宜的抗原抗体浓度和比例 二、抗原抗体反应的影响因素 1.电解质 2.温度 3.酸碱度 （一）凝集反应 （二）沉淀反应 （三）免疫标记技术 三、检测抗原和抗体的体外试验 直接凝集 间接凝集 （一）凝集反应 三、检测抗原和抗体的体外试验 （二）沉淀反应 免疫比浊法 单向琼脂扩散 双向琼脂扩散 三、检测抗原和抗体的体外试验 免疫酶测定法 免疫荧光技术 放射免疫技术 1 2 发光免疫分析 胶体金技术 4 5 3 （三）免疫标记技术 三、检测抗原和抗体的体外试验 间接ELSA 双抗夹心法 BSA-ELISA 酶标记的特异性抗体在组织（或细胞）原位通过抗原抗体反应和呈色反应，对相应抗原进行定位、定性和定量检测的技术。 ELISA 酶免疫组化技术 1.免疫酶测定法 三、检测抗原和抗体的体外试验 酶标记的特异性抗体对蛋白质进行定性及半定量分析的技术。 凝胶电泳-转膜-抗原抗体+显色（显影）反应。 免疫印记技术 三、检测抗原和抗体的体外试验 1.免疫酶测定法 酶联免疫吸附试验 三、检测抗原和抗体的体外试验 免疫印迹法检测HIV抗体 三、检测抗原和抗体的体外试验 2.免疫荧光技术 直接荧光法 间接荧光法 蛋白质芯片技术 免疫荧光法 三、检测抗原和抗体的体外试验 单击此处推荐文章标题 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * *