富锗灵芝菌丝体氨基酸及超氧化物歧化酶含量的测定.docVIP

富锗灵芝菌丝体氨基酸及超氧化物歧化酶含量的测定 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：富锗灵芝菌丝体氨基酸及超氧化物歧化酶含量的测定 1 1 材料与仪器 2 2 方法 3 3 实验结果与讨论 4 文2：十大功劳对小鼠血清超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量的影响 5 1 器材与方法 6 3 讨论 8 参考文摘引言： 9 原创性声明（模板） 9 文章致谢（模板） 10 正文 富锗灵芝菌丝体氨基酸及超氧化物歧化酶含量的测定 文1：富锗灵芝菌丝体氨基酸及超氧化物歧化酶含量的测定 Determination of SOD and Amino Acids in Geenriched Mycelia of Ganoderma lucidum Abstract:Objective:To determine the contents of SOD and amino acids in Geenriched mycelia of Ganoderma lucidum and explore the optimum dosage of GeO2 in culture :The contents of amino acids were analyzed by high performance liquid chromatography and SOD was determined by nitroblue tetrazolium photoreduction :Adding GeO2 400 mg#12539;L-1 to the culture medium the contents of amino acids and SOD in Geenriched mycelia of Ganoderma lucidum increase by % and % respectively over normal mycelia of Ganoderma :It provides a firm foundation for application of Geenriched mycelia of Ganoderma lucidum. Key words:Ganoderma lucidum； Geenrichment; Amino acids; Superoxide dismutase (SOD) 灵芝（Ganoderma lucidum）是我国医药宝库中的一颗灿烂明珠，其有益心气、益肺气、坚筋骨、利关节、安神补肝等多种功用。天然灵芝含有机锗，可促进血液循环，对肿瘤、癌症有明显抑制和辅助 治疗 效果，并对糖尿病、高血压、胃炎、老年痴呆患者有治疗保健作用。因此以GeO2为锗剂，通过液体深层培养获得富锗灵芝菌丝体，并对其进行深入地研究，成为近年来比较活跃的领域［1～3］。本文利用不同浓度的GeO2作为添加剂培养灵芝菌丝体，然后检测富锗灵芝菌丝体的氨基酸组成和含量及SOD的活性，以探讨GeO2对灵芝菌丝体生长及代谢的影响，为富锗灵芝菌丝体作为营养和药用的补锗剂提供 参考 。 1 材料与仪器 供试菌种 赤芝Ganoderma lucidum,AS. 565，由本院提供。 斜面培养基（%）马铃薯（去皮）20；葡萄糖 2；KH2PO4 ；MgSO4#12539;7H2O ；琼脂 2；pH 自然 。 摇瓶种子和发酵培养基（%）马铃薯（去皮）20；葡萄糖2；麦麸2；蛋白胨；pH自然。以上的培养基均经常规灭菌。 药品标准品SOD（Sigma公司），其他化学试剂均为国产分析纯。 仪器岛津UV-2401PC紫外分光光度计，安捷伦1100型高效液相色谱分析仪。 2 方法 摇瓶种子培养250 ml三角瓶装培养基80 ml，加4粒玻璃珠，常规灭菌，接种新鲜固体斜面菌一环（约 cm2），28℃，120 r#12539;min-1摇瓶培养至出现细小菌丝球。 发酵培养500 ml三角瓶装培养基100 ml，分别添加0，20，40，80，200，400，800，1 000 mg#12539;L-1的GeO2，代号为A，B，C，D，E，F，G，H，常规灭菌，然后各接入上述种子液10 ml，28℃，100 r#12539;min-1，培养72 h。 SOD酶液的制备发酵培养的菌丝体经100目筛网过滤，用%NaCl溶液洗涤3次，布氏漏斗抽干，获得纯净菌丝体。称菌丝1 g，加3 ml mol#12539;L-1 TBE（Tris-H3BO4-EDTA）浸提液，冰浴下研磨成糊状，冷冻离心（10 000 r#12539;min-1）10 min，取上清液（粗酶液）置冰箱内保存备用。 菌丝干重测定将上述酶液