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尼莫地平在大鼠体内的药物代谢动力学研究 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：尼莫地平在大鼠体内的药物代谢动力学研究 1 1 材料和方法 2 2 试验结果 3 3 大鼠血药浓度 4 4 讨论 5 文2：23吲哚醌在大鼠体内的药代动力学研究 5 1 实验材料与设备 6 2 实验方法 7 3 实验结果 9 3 讨论 10 参考文摘引言： 10 原创性声明（模板） 12 文章致谢（模板） 12 正文 尼莫地平在大鼠体内的药物代谢动力学研究 文1：尼莫地平在大鼠体内的药物代谢动力学研究 尼莫地平是一种临床上 治疗 脑血管疾病广泛应用的钙离子拮抗剂。本实验探讨采用高效液相色谱法测定鼠血浆中尼莫地平血药浓度，建立HPLC测定鼠血浆中尼莫地平含量的方法及其药代动力学。 1 材料和方法 药物、动物和仪器 药品和试剂：尼莫地平某制药厂生产，尼莫地平对照品（ 中国 药品生物制品检定所），甲醇色谱纯，其他试剂为分析纯。动物：大鼠，体重200～250g，雌雄兼用，由省动物中心提供，给药前禁食过夜。仪器Shimadzu LC-10ADVP液相色谱仪，ShimadzuSPD-10A二极管阵列检测器，色谱工作站，Shimadzu LC-6A液相色谱仪，Wate 486可变波长检测，SR2000色谱数据工作站（上海三锐科技） 色谱条件 色谱柱：大连依利特Hypeil-C18柱（×200mm，5μm）；流动相：甲醇——水（87︰13）；流速：/min，柱温：35℃。测定波长240nm。 对照品溶液的配制 取经五氧化二磷60℃真空干燥至恒重的尼莫地平对照品约10mg，精密称定至100ml量瓶中，加氯仿溶解，流动相加至刻度，摇匀，即得浓度为100μg·ml－1的对照品溶液。精密量取及2ml分别置10ml量瓶中，以甲醇稀释至刻度，摇匀，即得浓度分别为1及20μg·ml－1的对照品溶液。 大鼠血浆中尼莫地平含量的测定 取大鼠血浆1ml加甲醇1ml，旋涡1min，加2mol· L－1碳酸钠溶液100μL，旋涡1min，加环已烷，旋涡提取3min，4000r min－1离心10min，取上清液4ml置另一离心管中，40℃水浴中氮气挥干，进样前用150μL甲醇溶解，进样50μL，外标法以样品峰面积 计算 生物样品中尼莫地平浓度。 给药剂量选择 根据预试验结果，大鼠显效剂量为·kg－1；急性毒性试验，灌胃给药，LD50＞，故选定的试验试量为10，20，40mg·kg－1。 大鼠药代动力学实验 实验用大鼠216只，雌雄各半，随机分成3组，每组雌雄各半，实验10，20，40mg·kg－1三个剂组，取尼莫地平适量，精密称定，用%羧甲基纤维素纳配成混悬液，供大量ig给药，给药容量为2ml·100g－1。于给药，1，，2，3，4，6，8，12，16，24，32h后不同时间大鼠股动脉取血，肝素抗凝，离心分离出血浆，－18℃冰冻保存，每一时间点用6只大鼠，分别测定各鼠的血浆药物浓度。 2 试验结果 按“尼莫地平血药浓度测定方法”项下操作，色谱图见图1。尼莫地平的保留时间为，内源性物质不干扰样品测定。色谱图见图1A为空白，B为体外，C为体内。 稳定性试验 将大鼠ig给药后不同时间取样后多作的血浆混合作为稳定性试验样本，进行以下试验：①样品当日提取测定作为基础值，另将同日已提取挥干溶剂的残渣管冷藏（0℃）放置2天后测定。②样品冷冻，-20℃放置，冷冻后第一次融化，取样测定。③已融化过一次的样品再冷冻放置，冷冻一周后第二次融化，取样测定。结果表明：与基础值比较，在3种样品放置条件下，P＞（α=），说明血样处理吹干后，冷藏放置2天内稳定；含药血浆冷冻放置较稳定，冷冻后融化2次对样品含量无影响。 线性关系考察 取离心管数支，精密加入不同量的尼莫地平对照品溶液，以空白血浆配成浓度为10、20、60、160、400、800、1600、3200ng·ml-1的标准血浆,按“大鼠血浆中药物浓度测定”项下操作,每种浓度2份,记录峰面积，以尼莫地平峰面积对浓度进行加权回归分析。结果表明尼莫地平在10～3200ng·ml-1范围内线性良好，10mg·kg-1剂量的随行标准曲线回归方程为：A=591C+415,r=；20mg·kg-1剂量的随行标准曲线回归方程为： A=606C+264,r=；40mg·kg-1剂量的随行标准曲线回归方程为：A=608C+809,r=。 提取回收率与方法回收率测定 取离心管数支，精密加入尼莫地平不同量吹干溶剂，使含尼莫地平绝对量为60、400、3200ng,加甲醇150L溶解残渣进样分析，得峰面积As。另取空白血浆配成含尼莫地平 60ng、400ng、3200ng