实验10 酶促转氨反应.docVIP

PAGE PAGE 1 实验10 酶促转氨反应 一、原理： 氨基酸分子上的氨基移到α—酮酸分子上的反应，称为转氨反应，转氨反应是氨基酸代谢的重要反应之一，由转氨酶催化。经转氨后，原来的氨基酸变成了酮酸，原来的酮酸则变成新的氨基酸。例如谷—丙转氨酶可催化如下反应。 COOH COOH CH3 CH2 CH3 CH2 GPT H C+NH2 + CH2 C==O + CH2 COOH C==O COOH H C NH2 丙氨酸 COOH COOH α—酮戊二酸 丙酮酸 谷氨酸 动物肝脏转氨酶有很高的活性：将鼠肝均浆提取液与丙氨酸和α—酮戊二酸混合液共同保温，即产生丙酮酸与谷氨酸。 丙酮酸与2·4一二硝基苯肼作用生成，在碱性环境下呈红色，颜色的深浅与丙酮酸生成量成正比，可用比色法测定。 二、试剂： PH7.4 0.2M的磷酸缓冲液。 0．2M Na2HPO4 81.0ml与0.2m NaH2PO419.0ml混合。 N