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紫苏提取物抗氧化活性及酚性成分的研究 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：紫苏提取物抗氧化活性及酚性成分的研究 1 1 仪器及试剂 2 2 方法与结果 2 3 讨论 5 文2：毛冬青酸性酚性及皂苷类成分分离鉴定 6 1 仪器与材料网 http: 8 2 方法网 http: 8 参考文摘引言： 9 原创性声明（模板） 10 文章致谢（模板） 10 正文 紫苏提取物抗氧化活性及酚性成分的研究 文1：紫苏提取物抗氧化活性及酚性成分的研究 紫苏为唇形科紫苏属Perilla frutesce (L.) britt.一年生草本植物，是传统的药食两用中药，在江浙各地均有种植，资源丰富，价格低廉。其主要含有紫苏苷、原花色素、紫苏素、木犀草素和芹黄素等多酚类化合物，具有抗炎、镇痛、抗衰老、清除和抑制自由基等作用［1］。有研究表明，紫苏叶中含有丰富的黄酮类化合物，具有清除自由基、抗衰老作用；紫苏的水溶性色素亦具有一定的抗氧化活性［2～3］。目前国内外研究主要集中在紫苏籽挥发油成分上，对紫苏尤其是紫苏的酚性成分研究较少。本文通过体外抗氧化实验，确定紫苏有效部位抗氧化活性及酚性成分组成，为其临床应用及各种成分的抗氧化药理作用研究提供理论依据。 1 仪器及试剂 仪器BS224S精密 电子 天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司),TU-1900双光束紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限公司），KQ-250DE数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司) 试剂和材料紫苏采自浙江杭州，经浙江中医药大学资源鉴定教研室姚振生教授鉴定为唇形科紫苏属植物Perilla frutesce (L.) britt.，粉碎后过40目筛。芦丁（批号100080-20030）、儿茶素（批号877-200001）、没食子酸（批号110831-200302），均购自 中国 药品生物制品检定所；大豆卵磷脂（批号）、DPPH（批号095K1452），均购自sigma公司。其他试剂均为分析纯。 2 方法与结果 供试品溶液的制备取5 g紫苏药材粉末，分别按表1加入20倍量提取溶剂，70℃水浴提取2次，1 h/次，合并滤液，浓缩至干，临用前配成所需浓度，作为供试品溶液。 紫苏酚性物质的含量测定［4～6］采用FeCl3-K3Fe(CN)6比色法，以没食子酸为标样制作标准曲线，测定紫苏中总酚酸含量；采用香草醛/硫酸比色法，以儿茶素为标样制作标准曲线，测定其原花色素含量；采用碱式铝盐比色法，以芦丁为标样制作标准曲线，测定其总黄酮含量。 抗氧化活性实验［7～9］ 清除自由基活力取提取物适量，加入25 μg/ml的DPPH甲醇溶液 ml，快速混匀，30 min后测定在516 nm处的吸光度。 计算 DPPH清除率：清除率(%)=（1- ［DPPH］t/［DPPH］t=0）×100% 其中［DPPH］t表示30 min时体系的吸光度；［DPPH］t=0表示0时刻体系的吸光度。 还原力测定取提取物适量，加入磷酸缓冲液（ mol/L，pH ） ml及1%铁氰化钾溶液 ml，50℃保温20 min后，加入10%三氯乙酸 ml，混匀后取 ml，加入蒸馏水 ml及%三氯化铁 ml。在700 nm处测定反应液吸光度值。吸光度值越大，表示还原力越强。 脂质体氧化法将大豆卵磷脂分散于去离子水中，20 kHz超声波处理30 min，周围以冰水冷却，制得大豆磷脂浓度为%的人工脂质体。取20 ml脂质体，加入提取物，以10 mmol乙酸铜20 μl催化氧化反应，混匀后放置于回转式恒温水浴振荡器上，于暗处37℃、100 min进行开口氧化实验，每隔一定时间测定共轭二烯氢过氧化物及丙二醛生成量。 共轭二烯氢过氧化物(CD)的测定：取1 ml氧化液，溶于3 ml甲醇，于234 nm处测定其吸光度，以摩尔消光系数ε=26 000 L·mol-1·cm-1计算脂质体体系中共轭二烯氢过氧化物的生成量（mmol/kg卵磷脂） 丙二醛（MDA）的测定：取 ml氧化液，加入1 ml MDA溶液，测定在532 nm处的吸光度，以摩尔消光系数ε=×105 L·mol-1·cm-1计算丙二醛的生成量（mmol/kg卵磷脂） 抗氧化效果用抑制率表示：抑制率(%)=（1-处理氧化产物生成量/空白氧化产物生成量）×100% 结果见表1及图1～4。 表1 紫苏酚性物质组成及抗氧化作用结果（略） 图1 紫苏提取物的还原力 图2 紫苏提取物对DPPH的清除作用（略） 图3 丙二醛的生成（略） 由表1和图1～4可知，紫苏各提取物均具有较强的抗氧化活性，可提高自由基的清除率，促进Fe3+的还原和抑制卵磷脂氧化产物的生成。其中，75%乙醇提取物自由基的清除率最强