腹腔镜胃癌根治术后腹腔冲洗液CEAmRNA的变化和意义临床医学.docVIP

腹腔镜胃癌根治术后腹腔冲洗液CEAmRNA的变化和意义临床医学 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：腹腔镜胃癌根治术后腹腔冲洗液CEAmRNA的变化和意义临床医学 1 3 讨论 4 文2：腹腔冲洗液CEAmRNA检测对胃癌微转移的临床评估及意义 5 1　资料与方法 6 2　结果 9 3　讨论 10 参考文摘引言： 13 原创性声明（模板） 14 文章致谢（模板） 14 正文 腹腔镜胃癌根治术后腹腔冲洗液CEAmRNA的变化和意义临床医学 文1：腹腔镜胃癌根治术后腹腔冲洗液CEAmRNA的变化和意义临床医学 【Abstract】 Objective To investigate the effect of laparoscopic-assisted radical gastrectomy on gas- tric cancer cells in peritoneal lavage fluid from patients with gastric cancer. Methods Peritoneal lavagefluid from 44 patients with gastric cancer was collected before and after laparoscopic-assisted radical gas- trectomy to detect carcinoembryonic antigen （CEA） mRNA expression using RT-PCR. Results Thepre-， and postoperative CEA mRNA positive rate was % （12/44） and % （16/44）， respective- ly， and there was no significant difference （P）. Conclusio Laparoscopic-assisted radical gas- trectomy doesnt increase the intraperitoneal free cancer cells. 【Key words】 gastric cancer; CEA mRNA; laparoscopic; radical gastrectomy 自1987年腹腔镜应用于胆囊切除术以来，由 于其微创优点，应用范围逐渐扩展到外科各个领 域。腹腔镜胃癌根治术在国内外开展的手术例数 均较少，尚处于探索之中。我院自2004年3月开 始行腹腔镜胃癌根治术，术后近期效果良好 ［1-2］ 。 为探讨腹腔镜胃癌根治术是否增加腹腔脱落癌细 胞进而增加腹膜微转移，本研究收集胃癌切除前后 腹腔冲洗液检测脱落癌细胞，采用高敏感性的聚合 酶链反应（PCR）技术，选择CEA mRNA为胃癌细 胞的靶RNA， 以了解腹腔镜胃癌根治术对胃癌腹 膜微转移的影响。现报告如下: 1 材料与方法 研究对象 行腹腔镜胃癌根治术患者共44例，平均年龄作者单位: 400038 重庆，第三军医大学西南 医院 普通外科 通讯 余佩武; 电话:（023）; E-mail: yupeiwu01 @ 51岁（30～71岁），术前经腹部CT、 电子 胃镜、病 理检查证实为胃癌。其中低分化腺癌31例，中分 化腺癌10例，黏液腺癌1例，高分化腺癌2例。 标本采集 建立气腹，置入腹腔镜探查，无腹腔种植转移， 无广泛淋巴结转移、浸润，无周围脏器侵犯，可以进 行腹腔镜胃癌根治术。术前、术后分别向腹腔内注 入无菌生理盐水150 ml冲洗，轻搅动后于Douglas 抽吸约50～100 ml，1 800 r /min，离心10 min后 取沉淀。 实验方法 RNA提取腹腔冲洗液离心沉淀RNA 提取采用RNA抽提试剂盒（北京博大泰克生物基 因技术有限公司），操作步骤按照试剂盒说明书进 行。 RT-PCR上海生工生物工程技术服务 有限公司合成引物序列。CEA mRNA PCR引物 A:5-TGTAGCTGTTGCAAATGCTTTAAGGA- AGAAGC-3;B:5-TCTGGAACTTCTCCTGGT- CTCTCAGCTGG-3，产物160 bp;内对照β-actin 引物序列:5-GCCACATCGCTCAGACAC-3;5- CATCACGCCACAGTTTCC-3，产物614 bp;按 RT-PCR试剂盒（北京博大泰克生物基因技术有限 公司）说明，在反应系统中加入总RNA 2μg，置于 42℃孵育120 min，95 ℃热变性5 min。将mRNA 逆转录成cDNA。PCR反应条件，按94 ℃ 50 s→ 55 ℃