添加丙氨酰谷氨酰胺胃肠外营养对烫伤大鼠空肠黏膜及蛋白质代谢的作用临床医学.docVIP

添加丙氨酰谷氨酰胺胃肠外营养对烫伤大鼠空肠黏膜及蛋白质代谢的作用临床医学 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：添加丙氨酰谷氨酰胺胃肠外营养对烫伤大鼠空肠黏膜及蛋白质代谢的作用临床医学 1 1 材料与方法 2 2 结 果 4 3 讨 论 5 文2：添加丙氨酰谷氨酰胺胃肠外营养对烫伤大鼠的作用 7 1 材料和方法 9 2 结 果 12 3 讨 论 13 参考文摘引言： 15 原创性声明（模板） 17 文章致谢（模板） 17 正文 添加丙氨酰谷氨酰胺胃肠外营养对烫伤大鼠空肠黏膜及蛋白质代谢的作用临床医学 文1：添加丙氨酰谷氨酰胺胃肠外营养对烫伤大鼠空肠黏膜及蛋白质代谢的作用临床医学 谷氨酰胺(glutamine,Gln) 是体内含量丰富的游离氨基酸，它是小肠黏膜上皮细胞及所有快速增生细胞特别是免疫细胞的能源物质，被认为是机体在应激状态下的“条件必需氨基酸”。烫伤时机体出现应激反应，表现为体内蛋白质，尤其是骨骼肌蛋白质分解和尿氮排泄增加，Gln消耗增加，血浆及组织中Gln浓度下降。应激状况下，补充Gln有可能改善机体氮平衡、促进机体蛋白质合成、减轻小肠黏膜的萎缩。但Gln水溶解度低，且不稳定，在加热灭菌时生成有毒的焦谷氨酸和氨［1］，限制了其在肠外营养中的使用，而丙氨酰（Ala）Gln二肽克服了以上缺点，进入体内很快生成Gln。本实验观察了添加AlaGln的全胃肠外营养（TPN）对烫伤大鼠蛋白质代谢及空肠黏膜的作用。 1 材料与方法 动物分组 33只雄性SD大鼠，体重200～250 g，随机分为非烫伤正常参照组（正常组）、传统TPN组（传统组）和二肽TPN组（二肽组）3组，每组11只。 中心静脉置管 禁食24 h后，传统组和二肽组大鼠称重，在2%氯氨酮（100 mg·kg－1）腹腔内注射麻醉后，以8%～10%硫化钠水溶液脱去颈、背部的毛，温水擦净，碘伏消毒皮肤后，右颈部作纵形切口，显露右侧颈外静脉，远端结扎，近端插入外径 mm、内径 mm的硅胶管至上腔静脉（插入～ cm）。硅胶管自皮下隧道从背部肩胛间皮下引出后接保护弹簧及自制旋转装置。正常组不置管。 烫伤模型制作和饲养 根据公式S=×W2/3 ［S为体表面积（m2）、W为大鼠体重（kg）］ 计算 出大鼠体表面积。在大鼠仍处于麻醉状态下，将传统组和二肽组大鼠已行脱毛处理的背部浸入100 ℃水中12 s，造成30%体表面积的Ⅲ度烫伤。伤后立即腹腔内注射林格液 ml·(100 g)-1，置入代谢笼，自中心静脉置管用微量注射泵持续注林格液 ml·(100 g)-1抗休克 治疗 。正常组不做烫伤模型，置入笼中自由饮食。饲养室内温度保持在25 ℃左右，每天保持约12 h光照，紫外线消毒室内空气每天1次，酒精擦洗代谢笼以保持代谢笼清洁，每天碘伏消毒烫伤创面和手术切口。 营养支持 传统组和二肽组大鼠接受等热量等氮量TPN：热量780 kJ·kg-1·d-1，采用葡萄糖和脂肪乳剂（30%英特利匹特，华瑞公司生产）双能源3∶2比例提供。氮量 g·kg-1·d-1,传统组氮源由%乐凡命（华瑞公司生产）供给，二肽组氮源由%乐凡命中添加AlaGln（费森尤斯公司生产的20%力肽提供，其中力肽提供的氮量占总氮量的48%）。非蛋白热量∶氮量=434 kJ∶1 g；两组TPN液中均加入适量的水溶性和脂溶性维生素、微量元素、电解质、胰岛素（按每10 g葡萄糖1 U给予），配方见表1。自中心静脉插管用微量注射泵均匀持续输注TPN液，烫伤当日每天每100 g体重给予 ml。第2～7天每天每100 g体重 ml。第8天晨处死大鼠取标本。表1 传统组和二肽组TPN营养液配方 标本收集与检测 体重变化 第8天大鼠称重，观察TPN前后的体重变化情况。 血生化检查 腹主动脉穿刺取血，置入干燥管中，血凝后离心20 min（1 500 r·min－1），取上清－20 ℃冷冻保存，采用全自动生化分析仪检测血清总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（G）,免疫浊度法检测前白蛋白（PAB）、转铁蛋白（TRF） 肌肉组织中Gln含量的测定 取大腿肌肉1块，立即液氮冷冻，移入－80 ℃ 深低温冰箱保存，集中用高效液相色谱法测定肌肉中Gln的含量［2］ 氮平衡和累积氮平衡测定 收集大鼠24 h尿液，微量凯氏定氮法测出24 h尿液中氮量。氮平衡（g·kg－1）=［入氮量（g）－出氮量（g)］/体重（kg）。TPN时，入氮量即营养中氨基酸的含氮量，出氮量主要为24 h尿液中的氮量。 空肠黏膜形态学观察 距Treitz韧带8 cm处取一段空肠，10%福尔马林溶液固定，常规病理切片，于光镜下用多媒体彩色病理图文分析系统测量绒毛高度（VH