中药复方对2型糖尿病大鼠的胰腺中Bcl2Bax表达的影响临床医学.docVIP

中药复方对2型糖尿病大鼠的胰腺中Bcl2Bax表达的影响临床医学 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：中药复方对2型糖尿病大鼠的胰腺中Bcl2Bax表达的影响临床医学 1 1 材料与仪器 2 2 方法 3 3 结果 4 4 讨论 5 文2：药桑不同提取物对2型糖尿病大鼠的治疗作用 6 1 材料与方法 7 2 结 果 9 3 讨 论 10 参考文摘引言： 11 原创性声明（模板） 12 文章致谢（模板） 13 正文 中药复方对2型糖尿病大鼠的胰腺中Bcl2Bax表达的影响临床医学 文1：中药复方对2型糖尿病大鼠的胰腺中Bcl2Bax表达的影响临床医学 糖尿病是一种常见的内分泌系统代谢障碍性疾病，其发病率有逐年上升趋势，其特征性表现为高血糖和糖尿。西医方面虽有多种治疗方法和药物，但由于西药的毒副作用，使西药在糖尿病的治疗方面未能取得突破性进展。近年来，中医药在防治糖尿病方面表现出巨大的潜力，无论是单味中药还是中药复方，在治疗糖尿病方面均显示出很大优势［1,2］。本实验以验方生地、山药、枸杞和山萸肉为基础经提取制成本草消渴丹，通过干预2型糖尿病大鼠模型，观察其对2 型糖尿病大鼠血糖和胰腺凋亡相关基因Bcl-2和Bax的表达的影响，为临床用药提供科学依据。 1 材料与仪器 药物将复方中药（主要成分：生地20 g，山药20 g，枸杞子10 g，山萸肉15 g）分别用醇提水沉法提取、浓缩、干燥、制成颗粒剂，每克颗粒剂相当于原药材 g，由河北大学医学部药剂教研室提供，以上药材购自保定市中药饮片有限公司。盐酸二甲双胍片，规格每片 g，由天津太平洋制药有限公司提供，批号071204；链脲佐菌素（STZ）由美国Sigma提供，批号S-0130；TRI-ZOL和RT-PCR药盒等购自GIBCO-brL公司, 100 bp DNA梯度标记物为PROMEGA公司产品。其他试剂均为市售产品。 仪器AR1530 电子 分析天平(1/1000，美国奥豪斯)；GT-1640京都血糖仪（SUPER GLUCOCARDⅡ）及试纸(由日本ARKRAY，Inct 提供)；PCR仪，型号T1/T1+，德国Biometra生产；SP-2102/756型紫外可见分光光度计，上海光谱仪器有限公司生产；凝胶成像系统，BIO-RAD Company生产。 高脂饲料的制备［3］ 基础饲料：碳水化合物占60%，蛋白质占22%，脂肪占10% (植物脂肪为主)，其它成分占8%。高脂、高糖饲料由基础饲料加炼猪油10%、蔗糖20%、猪油10%、胆固醇%、胆酸钠1%，其中碳水化合物占50%，蛋白质占13%，脂肪占30%(动物脂肪为主)，其它成分占7%，由河北医科大学医学动物实验中心加工成饲料颗粒。 动物清洁级健康雄性Wister大鼠32只，体质量（±）g，由河北医科大学实验动物中心提供（合格证号604104），饲养在室温（20～25℃），相对湿度40%～70%的环境条件下，每笼8只，共分4笼，自由采食、饮水。 2 方法 造模与分组［3］ 将上述大鼠适应性饲养1周后，称重，随机分为两组，第1组8只为正常对照组，喂以基础饲料，第2组24只大鼠用于构造2型糖尿病模型。构造模型组以高脂、高糖饲料饲喂3周后，一次性腹腔注射STZ 25 mg/kg体质量(STZ溶于柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液，所配浓度为10 mg/ml)；对照组腹腔注射相应体积的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。构造模型组继续高糖、高脂饲料饲养4周后，禁食12 h，按2 g/kg体质量灌喂20%D-葡萄糖溶液，做口服葡萄糖耐量试验，凡0 min和120 min血糖分别≥ mmol/L或葡萄糖负荷后2 h血糖≥ mmol/L的大鼠［4］ 为造模成功。 选择造模成功的大鼠24只按体质量编号，参照随机数字表法分为3组，分别为模型组、二甲双胍组、本草消渴丹治疗组。各组均继续喂以高糖高脂饲料4周，并每周称体质量。 治疗第7周后，各组动物分别灌胃相应药物或生理盐水，1次/d，给药按人与大鼠体表面积比折算成等效剂量。对照组、模型组分别每日灌胃等剂量的生理盐水；二甲双胍组每日灌胃二甲双胍70 mg·kg-1，中药治疗组每日灌胃本草消渴丹 g·kg-1。 糖耐量实验实验期末空腹8 h采尾静脉血后，以50%葡萄糖溶液灌胃，剂量为 g/kg，然后检测在0，，1，2 h后的血糖。由梯形累加法 计算 血糖曲线下区域面积（area under curve，AUC，mmol·h-1·L-1） RT-PCR检测胰腺Bcl-2，Bax基因表达水平4周实验结束后，各组大鼠断颈处死，收集胰腺利用Trizol试剂提取总RNA，逆转录合成cDNA。根据NCBI中cDNA序列设计