分子生物学实验A教学大纲.docx

总 总 学 时 分子生物学实验 A 一、课程说明 课程编号： 280302Z11 课程名称：分子生物学实验 A/Molecular Biology Experiments A 课程类别：专业教育课程 学时/学分： 48/1.5 先修课程：生物化学、分子生物学、生物化学实验 适应专业：生物科学 教材、教学参考书： 1. 主编．分子生物学实验指导．长沙：中南大学出版社． 2015； 2. 药立波主编．医学分子生物学实验技术（第三版） ．北京：人民卫生出版 社． 2014． 二、课程设置的目的意义 分子生物学实验是生物科学专业学生实验技能与素质培养不可缺少的一个 重要环节。 通过分子生物学实验的教学， 不仅使学生巩固和加强课堂所学的基础 理论知识，更重要的是培养学生的实验操作能力、分析问题和解决问题的能力， 养成严肃认真、 实事求是的科学态度和严谨的工作作风， 培养学生的创新精神和 创新能力。 三、课程的基本要求 知识： 掌握感受态细胞的制备、大肠杆菌转化、琼脂糖凝胶电泳、基因组 DNA 的提取及电泳分析、质粒 DNA 的提取及电泳分析、 DNA 的限制性酶切及 电泳分析、真核细胞质 RNA 的提取及电泳分析、逆转录及实时荧光定量 PCR、 Western免疫印迹技术的实验原理 。 能力：掌握感受态细胞的制备、大肠杆菌转化、琼脂糖凝胶电泳、基因组 DNA 的提取及电泳分析、质粒 DNA 的提取及电泳分析、 DNA 的限制性酶切及 电泳分析、真核细胞质 RNA 的提取及电泳分析、逆转录及实时荧光定量 PCR、 Western免疫印迹技术的操作流程。掌握分析实验结果的能力。 素质：掌握分子生物学实验的基本技能，有求实创新的意识和精神。 四、教学内容、重点难点及教学设计 章节 实验一 分子生 物学基 本实验 操作技 教学内容 分子生物学基本 实验操作技能； 感受态细胞制备 4 学时分配 讲课 (含研讨 ) 实践 4 教学重点 学习分子生 物学实验常 用装置和常 用仪器设备 的使用； 感 教学方案设计 教学难点 （含教学方法、 教学手段） 教师示范基本实 验操作技能，学 生实验操作，分 析讨论实验结果 ~ 1 ~ 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 章节 能及感 受态细 胞 制备 实验二 大肠杆 菌转化 实验三 琼脂糖 凝胶电 泳 实验四 人类基 因组 DNA 的 提取及 电泳分 析 实验五 质粒 DNA 的 提取及 电泳分 析 实验六 DNA 的 限制性 酶切及 电泳分 析 实验七 真核细 胞质 RNA 的 提取及 电泳分 析 实验八 逆转录 及实时 荧光定 量 PCR 实验九 Western 免疫印 迹技术 （一） 实验十 Western 免疫印 教学内容 大肠杆菌转化实 验原理、实验操 作、结果分析 琼脂糖凝胶电泳 实验原理、实验 操作、结果分析 人类基因组 DNA 提取的实 验原理、实验操 作、结果 分析 质粒 DNA 提取 的实验原理、实 验操作、结果分 析 DNA 的限制性 酶切实验原理、 实验操作、结果 分析 真核细胞质 RNA 提取的实 验原理、实验操 作、结果 分析 逆转录及实时荧 光定量 PCR 实 验原理、实验操 作、结果分析 Western 免疫印 迹技术的原理； 蛋白质提取、电 泳、 转膜 封闭、 抗体孵育、 洗膜 总 学 时 学时分配 讲课 (含研讨 ) 实践 4 4 4 4 4 4 4 4 4 教学方案设计 教学重点 教学难点 （含教学方法、 教学手段） 受态细胞的 制备。 菌落接种和 培养；大肠 杆菌转化。 琼脂糖凝胶 电泳原理、 实验操作、 注意事项和 结果分析 基因组 DNA 提取的原理 和操作，琼 脂糖凝胶电 泳及结果分 析。 质 粒 DNA 提取的原理 和操作，琼 脂糖凝胶电 泳及结果分 析。 配制限制性 酶切反应体 系，酶切结 果分析。 RNA 提取的 原 理 和 操 作， RNA 琼 脂糖凝胶电 泳结果分析 实时荧光定 量 PCR 的原 理； PCR 参 数的选择与 优化 Western 免 疫印迹技术 的原理、蛋 白质提取、 SDS- 聚丙烯 酰胺凝胶电 泳、