酶促反应动力学 .pptxVIP

酶促反应动力学初速度 酶促反应速度逐渐降低 产物0时 间酶促反应的时间进展曲线反应初速度随底物浓度变化曲线 在其他因素不变的情况下,底物浓度对反应速度的影响呈矩形双曲线关系。VVmax[S]当底物浓度较低时反应速度与底物浓度成正比;反应为一级反应。VVmax[S]随着底物浓度的增高反应速度不再成正比例加速;反应为混合级反应。VVmax[S]当底物浓度高达一定程度反应速度不再增加,达最大速度;反应为零级反应k1k3E + S ES P + Ek2（3）P→0 忽略 这步反应 (一)中间复合物学说 k4三个假设:(1)E与S形成ES复合物的反应是快速平衡反应,而ES分解为E及P的反应为慢反应,反应速度取决于慢反应即 V＝k3[ES]。(2)S的总浓度远远大于E的总浓度,因此在反应的初始时期,S的浓度可认为不变即[S]＝[St]。(二)酶促反应的动力学方程式1、米氏方程的推导Vmax[S] Ｖ──＝ Km + [S] 1913年Michaelis和Menten提出反应速度与底物浓度关系的数学方程式,即米－曼氏方程式,简称米氏方程(Michaelis equation)。[S]:底物浓度V:不同[S]时的反应速度Vmax:最大反应速度(maximum velocity) Ｋm:米氏常数(Michaelis constant) k1k3E + S ES P + Ek2稳态时ES浓度不变 反应速度 V=k3[ES] ES的生成速度=消耗速度 k1[E][S]=k2[ES] + k3[ES] E的质量平衡方程 [E]=[Et] - [ES](Ⅲ)(Ⅰ)(Ⅱ)k1k3E + S ES P + Ek2 V[S]Km + [S]V= k2 + k3 k1米氏常数Km=稳态时ES浓度不变反应速度 V=k3[ES] ES的生成速度=消耗速度 k1[E][S]=k2[ES] + k3[ES]E的质量平衡方程 [E]=[Et] - [ES]米氏方程 V=Vmax=k3[ES]max=k3[Et]混合级 V[S]Km + [S]V=反应初速度随底物浓度变化曲线米氏曲线b、当[S]特别大时V=V[S]/[S]=V 0 级反应 a、当[S]特别小时V=V[S]/Km 一级反应V1V [S]＝2Km + [S] V[S]Km + [S]V=Km=?若 V＝V/2Km = [S]Km + [S] = 2[S]VVmaxVmax/2 Vmax[S] Vmax＝2Km + [S][S]Km2、动力学参数的意义(1)米氏常数Km的意义Km＝[S] ∴Km值等于酶促反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度,单位是mol/L。 ①Km是酶的特性常数: 与pH 、温度、离子强度、酶及底物种类有关,与酶浓度无关,能够鉴定酶。酶底物Km(mmol/L)脲酶尿素25溶菌酶6-N-乙酰葡萄糖胺0、006葡萄糖-6-磷酸脱氢酶6-磷酸-葡萄糖0、058胰凝乳蛋白酶苯甲酰酪氨酰胺2、5甲酰酪氨酰胺12、0乙酰酪氨酰胺32、0②能够判断酶的专一性和天然底物Km值最小的底物——最适底物/天然底物Km近似表示酶对底物的亲和力:Km越大、亲和力越小k1k3E + S ES P + Ek2 k2 + k3 k1Km=k2k3时Km≈k2(分离能力)/k1(亲合能力)Km越小,亲和力越强。[S]特别小时,反应速度就能达到特别大。性能优,代谢中这类酶更为重要③依照Km:判断某[s]时v与Vmax的关系判断抑制剂的类型④ Km可帮助判断某代谢反应的方向和途径催化可逆反应的酶对正/逆两向底物Km不同 —— Km较小者为主要底物一底物多酶反应乳酸脱氢酶(1、7×10-5)乳酸丙酮酸脱羧酶(1、0×10-3)丙酮酸乙醛丙酮酸脱氢酶(1、3×10-3)乙酰CoA丙酮酸浓度较低时:代谢哪条途径决定于Km最小的酶(2)Vmax和k3(kcat)的意义一定酶浓度下,酶对特定底物的Vmax也是一个常数。[S]特别大时, Vmax＝ k3[E] 。k3表示当酶被底物饱和时,每秒钟每个酶分子转换底物的分子数,——又称为转换数、催化常数kcat kcat越大,酶的催化效率越高 Vmax[S]Km + [S]kcat[Et][S]Km + [S]V=V=(3) kcat/km的意义:∵Vmax=kcat[Et] ∴当[S] Km时,[E]＝[Et]是E和S反应形成产物的表观二级速率常数。 其大小可用于比较酶的催化效率。kcat/km＝ kcat/km的上限为k1,即生