《电子显微镜技术》课程教学大纲（本科）.pdf

电子显微镜技术 Electron microscope technology 课程代码：903010103 学时数：32 （理论：22 ；实验：10） 学分数：2 一、教学目的 电子显微镜技术是当前从事细胞生物学、植物病理学、动物病理学、昆虫学、微生物学、病毒 学、分子生物学及动、植物生理学研究不可缺少的技术手段。通过该课程的学习，使学生了解和掌 握扫描电子显微镜、透射电子显微镜、激光扫描共聚焦显微镜的原理、结构及使用方法；进一步使 学生了解和掌握生物样品的超微结构观察、研究的现代技术和方法，并能够在生命科学领域研究中 应用这些方法；同时，增强学生对现代大型仪器的了解和运用能力，提高学生的综合素质。 二、教学内容、教学目标及学时分配 第一章 绪论（3 学时） 通过本章的学习，使学生了解显微技术的产生和发展过程；掌握光学显微镜发展的局限性及电 子显微镜产生的理论基础；理解并掌握入射光波长和分辨本领的关系；理解电子散射信号的产生及 在成像过程中的作用；掌握电子显微镜的特点；了解显微技术的发展及其在各学科领域中的应用。 1．电子显微技术的基本概念：分辨本领、分辨率、有效放大倍数和无效放大倍数、阿贝公式。 2. 电子显微镜产生的理论基础：入射电子束的波长、加速电压、分辨本领三者间的关系；电磁 透镜的概念、结构、作用；场深和焦深的概念。 3. 电子散射与显微成像：电子信号的产生及各自在显微技术中的作用。 4. 电子显微镜的特点：光学显微镜与电子显微镜的比较；电子显微镜的特点。 第二章 透射电子显微镜的结构、原理和使用（理论 3 学时；实验 2 学时） 通过本章的学习，掌握透射电子显微镜的结构；理解透射电子显微镜的成像原理；了解透射电 子显微镜使用程序。 1. 透射电子显微镜的结构：电子光学系统 （照明系统、样品室、成像放大系统、观察记录系统）； 真空系统和电气系统。 2. 透射电子显微镜的成像原理：眼睛的成像反差 （振幅反差、波长所差）；光学显微镜的成像 反差；透射电子显微镜的成像反差 （振幅反差、相位反差）；增加振幅反差的方法。 3. 透射电子显微镜的使用。 实验一 透射电子显微镜的结构和使用 （2 学时） 第三章 透射电子显微镜的样品制备技术（理论 5 学时；实验 2 学时） 263 通过本章的学习，掌握透射电子显微镜的样品制备技术，并能够根据不同的实验材料、实验目 的，选择相应的实验技术，解决具体问题；重点掌握超薄切片技术；理解正染色和负染色方法的 同；掌握冷冻制样技术的操作关键点；理解免疫电镜技术的原理；了解三种标记分子的标记特点； 了解单分子层平展法的原理。 1. 透射电子显微镜对样品的要求及应采取的措施。 2. 超薄切片制样技术：超薄切片技术术的程序每一步骤的目的、常用试剂及常用方法。 3. 负染色制样技术：负染色的概念；负染色技术的程序；常用负染色剂及方法。 4. 冷冻制样技术：冷冻制样技术原理和特点；冷冻制样技术的关键技术；冷冻保护；冷冻制样 技术的应用 （冷冻脱水技术、冷冻超薄切片技术、冷冻干燥技术、冷冻电镜技术）。 5. 免疫电镜技术：免疫电镜技术的概念；标记抗体 （铁蛋白、胶体金、酶）的概念、原理、特 点。 6. 生物大分子电镜制备技术：蛋白质样品的制备方法 （负染色方法和复型、金属投影法）；核 酸样品的制备方法 （单分子层平展法）。 实验二 透射电子显微镜样品制备技术（2 学时） 第四章 扫描电子显微镜的结构、原理和使用（理论 4 学时；实验 2 学时） 通过本章的学习，掌握扫描电子显微镜的结构、成像原理；理解扫描电子显微镜的工作原理； 了解扫描电子显微镜的使用方法。 1．扫描电子显微镜的成像原理和工作原理：二次电子信号的产生及影响因素；二次电子的成像 反差；扫描电子显微镜的同步扫描和像素亮度的控制；扫描电子显微镜的放大倍数和图像分辨率。 2 ．扫描电子显微镜的结构：电子光学系统 （电子枪、聚光镜、物镜、样品室）；扫描系统 （扫 描