第七章微生物的遗传和育种.ppt

第七章 微生物的遗传变异与育种;遗传学的一些概念;;;;4.饰变（modification）：;第一节 遗传变异的物质基础;一、3个经典实验 证明核酸是遗传物质的实验。 （一）转化实验 研究材料：肺炎链球菌，小白鼠 肺炎链球菌特点： S型——有荚膜，菌落表面光滑，属致病菌。致病性，人患肺炎，小白鼠患败血症而死亡。 R型——无荚膜，菌落表面粗糙，属非致病菌; 1928年，英国微生物学家Griffith(格里费斯）做了肺炎链球菌的转化实验。实验说明了加热杀死的S型菌，在细胞内有一种具有遗传转化能力的物质，可进入R型菌细胞内，使R型菌获得表达荚膜的遗传特性。;1944年 Avery（艾费里） 揭开了转化因子的化学本质。;（二）噬菌体的侵染标记实验;;（三）植物病毒的重建实验;RNA杂合病毒实验;二、遗传物质在细胞内的存在部位和方式;1.细胞水平;2.细胞核水平;3.染色体水平; 染色体的一般形态结构 ;染色体组型;4.核酸水平;DNA Supercoiling;DNA分子形成环状，这种环呈超螺旋状 ;5.基因水平;（二）原核生物的质粒;1.质粒（plasmid）定义：;质粒的检测;第二节 基因突变和诱变育种;一、基因突变;(一）基因突变类型;营养缺陷型——某一野生型菌株因基因突变而丧失合成一种或几种生长因子、碱基或氨基酸的能力，因而无法再在基本培养基上生长繁殖的变异类型。 必须在培养基中添加某种物质才能生长。 抗性突变型——某一野生型菌株因突变而产生了对某种化学药物或致死物理因子的抗性的突变株。 在加有相应药物或相应物理因子处理的培养基平板上选出。 ;3.条件致死突变型——突变后在某种条件下可正常生长、繁殖，而在另一条件下却无法生长、繁殖的突变型。 大肠杆菌Ts突变株，37℃正常生长，42 ℃死亡； T4噬菌体，在25 ℃可感染大肠杆菌，37 ℃不能感染。 4. 抗原突变型——因突变而引起的抗原结构发生改变。 细胞壁缺陷变异（L型细菌），荚膜或鞭毛成分变异，病毒蛋白变异。;;（二）突变率;（三）基因突变的特点;（三）基因突变的特点;（四）基因突变的自发性和不对应性的实验证明;;2、涂布实验;3、影印平板培养法;S=青霉素敏感菌株 R=青霉素抗性菌???;;实验分析;（五）基因突变及其机制;;1.诱发突变;基因突变（点突变）的诱变机制;（1）碱基置换（substitution）一对碱基被另一对碱基所置换。 转换（transition），即DNA链中的一个嘌呤被另一个嘌呤或是一个嘧啶被另一个嘧啶所置换； 颠换（transversion），即一个嘌呤被一个嘧啶,或是一个嘧啶被一个嘌呤所置换。;碱基置换后会出现下列几种情况;碱基置换后会出现下列几种情况;酪氨酸的密码子 UAC ?;A 直接引起置换的诱变剂;;;由亚硝酸引起的AT→GC的转换;A;B 间接引起置换的诱变剂;5-溴尿嘧啶（5-BU）;;（2）移码突变;;移码突变诱变剂;;;? (3)染色体畸变;转座（易位）现象;转座因子的插入引起受体DNA上靶序列的复制;突变的DNA变化;2、自发突变的机理;（1）细胞外的诱发因素;（2）细胞内的诱发因素;（3） DNA分子内部因素;（六）紫外线对DNA的损伤及其修复;;1、光复活作用（photoreactivation）;1、光复活作用（photoreactivation）;1、光复活作用（photoreactivation ）;2、暗修复作用（dark repair）;二、突变与育种;（二）诱变育种;营养缺陷型(auxotroph)的筛选;A.有关的三类遗传型个体：;B.有关的三类培养基;艾姆氏试验（Ames test）对化学诱变剂做检测; 艾姆斯氏试验;第三节 基因重组和杂交育种;一、原核生物的基因重组;重组与杂交的关系;一、原核微生物的基因重组;（一）转化;转化的过程;;自然转化过程;转染;（二）转导（Transduction）;;（1)?? 普遍性转导（Generalized transduction）;完全普遍转导证明实验;A株菌:trp- his＋ B株菌: trp＋ his-;;流产普遍转导;;（2）局限性转导Restricted transduction ;（2）局限性转导Restricted transduction ;;发生误切频率10 – 4 ~ 10 – 6 因此形成转导子的频率低 条件：感染复数m.o.i1;②高频转导;普遍性转导和限制性转导（低频） 的区别？？？;（3）溶源转变;（3）溶源转变;;（三）接合;;1946年J.Lederberg等采用E.coli的两株营养缺陷型进行实验;细菌接合;细菌接合实验;大肠杆菌的接合;F 质粒;大肠