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- 2022-03-24 发布于河北
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专题十一 基因、细胞、胚胎、生态工程
知识点一 基因工程
1.基因工程的概念:基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外DNA重组和转基因技术,赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,又叫做DNA重组技术。
2.基因工程的原理及技术原理:基因重组
3.基因工程的基本工具
种类
来源
功能
结果
限制性核酸内切酶(限制酶)
主要是从原核生物中分离纯化出来的。其原因是原核细胞易受外源DNA的侵袭,具有限制酶的原核细胞可选择性地破坏不同于自身DNA的外来DNA,从而适应环境。
能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一/特异性。
经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端。
DNA连接酶
E·coliDNA连接酶来源于大肠杆菌,;而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体,
E·coliDNA连接酶只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶能缝合两种末端,但连接平末端的之间的效率较低。
将相同末端的DNA片段链接在一起。
共同点:都缝合磷酸二酯键。
用两种限制酶同时处理质粒和含目的基因的片段,主要优点是可以防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化(也能防止反接/随意链接)。
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