第1章 维生素类药物的分析课件.pptVIP

C H H O O a S 3 a S O + H 2 N H O N 2 2 5 2 H O N H C O S 3 a 3 3 CH CH C Na SO 3 OH 3 3 CH CH C Na SO 3 OH 3 3 COCH CH 二氯靛酚钠滴定法 （二） USP JP 原理 1、 酚亚胺 二氯靛酚 ， ? ? ? ? 6- 2 VitC 自身指示终点法 方法 2、 空 样 二氯靛酚液 空白 样品 V V HAc HPO ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? - 3 （2）快速滴定 2min内 （1）酸性环境 HPO3-HAc 稳定VitC 防止其他还原性物质干扰 （3）剩余比色测定 （定量过量） （测剩余染料） 讨论 3、 （4）缺点 需经常标定 贮存≤一周 不稳定 干扰多 氧化力较强 HPLC法 （三） 1. HPLC的优点 灵敏度高 选择性高 分离分析同步 微量分析 干扰少 快速 2. HPLC法分离VitC常用方法及测 定对象 对象 制剂、生物样品、果汁 方法 离子交换色谱法 离子对色谱法 分配色谱法（正、反相） 血、尿、组织、细胞等 是一类抗佝偻病维生素的总称 目前已知的维生素D类物质至少有十种之多，它们都是甾醇的衍生物。 第四节 维生素D的分析 （一） 维生素D2（C28H44O，396.66） 结构与性质 一、 结构 维生素D3（C27H44O，384.65） 1．性状 均为无色针状结晶或白色结晶性粉末；无臭，无味；遇光或空气均易变质。 2．溶解性 维生素D2－在氯仿中极易溶解，在乙醇、丙酮或乙醚中易溶； 维生素D3－在乙醇、丙酮、氯仿或乙醚中极易溶解；二者均在植物油中略溶，在水中不溶。 （二） 性质 3．不稳定性 维生素D2、D3因含有多个烯键，所以极不稳定，遇光或空气及其他氧化剂均发生氧化而变质，使效价降低，毒性增强。本品对酸也不稳定。 4．旋光性 维生素D2具有 6个手性碳原子， 维生素D3有5个手性碳原子， 5．显色反应 本品的氯仿溶液，加醋酐与硫酸，初显黄色，渐变红色，迅即变为紫色，最后变为绿色。本反应为甾类化合物的共有反应。 6．紫外吸收特性 取本品，加无水乙醇溶解，照分光光度法，在265nm的波长处测定吸收度，维生素D2的吸收系数为460-490；维生素D3的吸收系数为465-495。 二、 1．与醋酐-浓硫酸反应 取维生素D2或D3约0.5mg，加氯仿5ml溶解后，加醋酐0.3ml与硫酸0.1ml，振摇，维生素D2初显黄色，渐变红色，迅即变为紫色，最后成绿色。维生素D3初显黄色，渐变红色，迅即变为紫色、蓝绿色，最后变为绿色。 鉴 别 试 验 (一) 显色反应 2．与三氯化锑反应 取本品适量（约1000单位），加1,2-二氯乙烷1ml溶解，加三氯化锑试液4ml，溶液即显橙红色，逐渐变为粉红色。 3．其它显色反应 维生素D + 三氯化铁 橙黄色 维生素D + 二氯丙醇和乙酰氯试剂 绿色，均可用于鉴别，但专属性不强。 取维生素D2，精密称定，加无水乙醇溶解并定量稀释制成每1ml中含40mg的溶液，依法测定，比旋度为＋102.5°～＋107.5°； 维生素D3加无水乙醇溶解并定量稀释制成每1ml中含5mg的溶液，依法测定，比旋度为＋105°～＋112 ° （二） 比旋度鉴别 维生素D2、D3可用薄层色谱法、HPLC法和制备衍生物测熔点进行鉴别。此外，亦可通过其红外、紫外吸收光谱的特征加以鉴别。 （三） 其它鉴别方法 取维生素D10mg，溶于96％乙醇10ml中。取此液0.1ml，加乙醇1ml和85％硫酸5ml。维生素D2显红色，在570nm波长处有最大吸收；维生素D3显黄色，在495nm波长处有最大吸收。此反应也用于D2和D3的含量测定。 （四） 维生素D2、D3的区别反应 三、 ChP（2019年版）规定维生素D2检查麦角甾醇，而维生素D3则不作要求。 方法：取本品10mg，加90％乙醇2ml溶解后，加洋地黄皂苷溶液（取洋地黄皂苷20mg，加90％乙醇2ml，加热溶解制成）2ml，混合，放置18h，不得发生浑浊或沉淀。 杂 质 检 查 （一） 麦角甾醇的检查 D族维生素都是甾醇的衍生物，只是侧链有所不