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第十二章 翻译Translation 翻译----以mRNA为模板合成蛋白质 第一节 参与蛋白质生物合成的物质 mRNA----模板 rRNA----构成核糖体作为蛋白质合成场所 tRNA----搬运工具 氨基酸----原料 蛋白质因子----(起始因子IF,延伸因子EF,释放因子 RF,等等) 酶----氨基酰-tRNA合成酶,转肽酶,转位酶,等 无机离子----Mg++ 一、 mRNA是翻译的直接模板 原核生物与真核生物mRNA的区别 多顺反子 单顺反子 5’端帽子结构 3’端polyA尾巴 三联体密码----mRNA上每三个相邻的碱基构成一个遗传密码,决定一种氨基酸. 遗传密码的特点 1.连续性:密码子间紧密相连,密码子阅读从起点开始一直读到终点信号为止;插入或删去一个碱基,会产生移码作用,引起移码突变。一般遗传密码不重叠。ABCDEFG……..,应读为ABC,DEF,…..,很少有BCD,CDE的阅读 2.简并性:许多氨基酸可由几组不同的密码子编码。这种由几组密码子编码同一种氨基酸的现象称密码的简并;可以编码相同氨基酸的密码子称同义密码子;色氨酸和甲硫氨酸只有一个密码子(UGG和AUG) 3.摆动性:专一性由头两位碱基决定,第三位碱基的专一性不强,这种特性称“摆动性 4.有起始子(AUG)和终止子(UAG,UAA,UGA) 5.通用性:几乎所有生物都共用同一套密码。但线粒体DNA则有所不同(如人线粒体):UGA不是终止密码子,而编码色氨酸;AGA和AGG不编码精氨酸,而是终止密码子 二 核糖体是肽链合成的场所 核糖体由大、小亚基构成 原核生物: 70s (30s, 50s) 真核生物: 80s (40s, 60s) 核糖体 是蛋白质合成的场所。在细胞中以游离形式存在,或与mRNA结合成串联的多核糖体(原核生物),或与内质网结合而形成粗糙内质网(真核生物)。 1、结构:由大、小两个在一定条件下可解聚的亚基构成 (1)原核生物:30S小亚基---21种蛋白质和16S rRNA 50S大亚基---34种蛋白质和5S、23S rRNA (2)真核生物:40S小亚基---30多种蛋白质和18S rRNA; 60S大亚基---50多种蛋白质和5S、23S rRNA 2、结构模型:小亚基哑铃状,大亚基椅子状,相互结合形成结合面上的一大空隙;小亚基中的rRNA识别mRNA上多肽合成的起始位点,所以能与mRNA结合;大亚基上有两个tRNA位点:氨酰基位点(A位点)和肽酰基位点(P位点),所以能与tRNA非专一地结合。另外还有E位点(即空载tRNA的结合位点)。 多聚核糖体 在一条mRNA链上,多个核糖体呈串珠状排列(间隔80个核苷酸),多个核糖体同时在一条mRNA上进行翻译, 大大加速蛋白质合成的速度,提高了mRNA的利用率 三 tRNA和氨基酰-tRNA tRNA的反密码子与mRNA的密码子配对 tRNA的3--端CCA--OH是氨基酸的结合位点 氨基酰-tRNA合成酶具有绝对专一性 校正活性 氨基酰-tRNA的写法 Arg-tRNAarg fMet-tRNAfmet (原核) Met-tRNAimet (真核) Met-tRNAemet 氨基酰-tRNA的合成(氨基酸活化) 1、氨基酸-AMP-酶复合物的形成: ? RCHCOOH + ATP + 合成酶 RCHCO~AMP? 合成酶 + PPi ? NH2 NH2 氨基酸的羧基通过酸酐键与AMP上的5’-磷酸基相接,形成高能酸酐键 2、氨基酸从复合物上转移到相应的tRNA上: ? 氨基酰~AMP ?合成酶 + tRNA 氨基酰-tRNA + 合成酶 + AMP 氨基酸的羧基
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