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浅谈病理诊断分子生物学技术应用的质量控制
文档信息
:
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目录
TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1
正文 1
文1:浅谈病理诊断分子生物学技术应用的质量控制 1
1 分子生物学技术在中枢神经系统疾病的应用 1
2 病理诊断分子生物学技术应用的质量控制 2
3 分子生物学技术在临床神经病理诊断中的应用 2
文2:浅谈病理诊断分子生物学技术应用的质量控制 5
参考文摘引言: 7
原创性声明(模板) 7
文章致谢(模板) 8
正文
浅谈病理诊断分子生物学技术应用的质量控制
文1:浅谈病理诊断分子生物学技术应用的质量控制
1 分子生物学技术在中枢神经系统疾病的应用
分子生物学技术在中枢神经系统疾病中的主要应用涉及2个方面内容:外源性致病基因检测和内源性致病基因检测。其中外源性致病生物主要包括细菌、病毒、寄生虫等。外源性致病生物感染人体时, 其核酸相对容易提取, 而分子生物学相对灵敏和特异, 所以应用前景非常广阔。对于内源性致病基因检测诊断, 以往主要在遗传性疾病诊断方面应用较多。随着技术的进步, 在肿瘤领域, 特别是神经系统肿瘤的诊断和治疗领域也迈进了一个新纪元。2016世界卫生组织《中枢神经系统肿瘤分类 (第4版修订版) 》对中枢神经系统肿瘤, 尤其是胶质瘤诊断必须包含完整的分子生物学信息方为一份合格的诊断报告, 其显示的是内源性致病基因的变化情况及不同类型胶质瘤的不同基因学改变。
2 病理诊断分子生物学技术应用的质量控制
(1) 实验室必须通过国家卫生和计划生育委员会临床检验中心审核, 具备合格的检测资质。 (2) 应用检测试剂盒具备合格注册证。 (3) 完善、合理的实验设计是基本保证。 (4) 选择灵敏度较高的分子生物学技术。 (5) 严格、规范的操作规程, 以聚合酶链反应 (PCR) 方法为例, 该方法灵敏度较高, 但要求实验开始前、进行中、结束后严格按照操作规程操作, 防止气溶胶等可能的污染。 (6) 保证实验的可重复性和稳定性也是质量控制的关键所在。
3 分子生物学技术在临床神经病理诊断中的应用
分子生物学新技术随着科技的发展, 目前较常应用于临床的检测技术包括:免疫组织化学 (IHC) 、荧光原位杂交 (FISH) 、显色原位杂交 (CISH) 、PCR、基因测序等检测技术。
IHC
IHC是利用抗原抗体的特异性反应来定位组织和细胞中某种成分的一种方法。IHC以其特异性强、灵敏度高、定位准确等特点, 已被广泛地应用于神经系统肿瘤的临床诊断和治疗。
神经系统恶性肿瘤的起源判定
由于某些神经系统肿瘤的低分化, 而无法明确肿瘤细胞起源, 但临床上需要根据肿瘤的分类进行治疗与预后判断, 这时需要应用IHC。如MAP-2的标记阳性, 可判断出肿瘤细胞起源于神经上皮;脑胶质瘤存在很大的异质性, 仅从形态学基础很难区分是星形细胞瘤, 还是少突胶质细胞瘤, GFAP、Olig-2、Vimentin基本可从标记的肿瘤细胞进行区分。这就强调了在肿瘤诊断中, 常常会使用一组抗体而不是单个抗体。
转移性肿瘤的分化方向
判定以角蛋白为例, 高分化的癌, 呈强阳性表达;而且角蛋白的含量与分化程度有关, 低分化或未分化癌含量较低、表达强度较弱, 并且有时会表达间叶源性标记物Vimentin。
明确病变的性质———肿瘤或非肿瘤
以中枢神经系统原发淋巴瘤为例, 通过T细胞标记CD3、CD45RO及B细胞标记CD20、CD79a可以判断中枢淋巴瘤是T或B细胞起源;通过标记Ig轻链 (κ、λ) 可区分部分B细胞性淋巴瘤与B细胞反应性增生, 前者常表达单一的Ig轻链 (κ+/λ+) , 后者常为多克隆Ig轻链 (κ+、λ+) 。
CISH
CISH是一种在组织切片、细胞涂片上对核酸进行定性、定位和相对定量研究的一种分子生物学方法[1]。CISH检测具有许多优点[2-3]。首先, CISH使用高度特异性的地高辛标记探针进行原位杂交, 操作步骤简单, 信号稳定, 可以直接在普通光学显微镜下辨认、计数染色体数目。其次, CISH信号亮度不衰减, 可长期保存。直接计数, 较易于评估。在中枢神经系统中主要用于以EB病毒引起的原发性和继发性淋巴瘤的诊断, 巨细胞病毒感染相关的皮质发育异常、胶质瘤等的诊断, 以及脑内转移性鼻咽癌和原发中枢神经系统小细胞恶性肿瘤的鉴别诊断, 鼻咽癌多与EB病毒相关, 而目前的研究未发现原发中枢神经系统小细胞恶性肿瘤与病毒感染有明确相关性。
FISH
FISH是基于DNA双链互补的特性, 采用荧
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