基于SHS结合GCMS分析技术构建测定白酒酒醅中乙醇含量的内标法.docVIP

基于SHS结合GCMS分析技术构建测定白酒酒醅中乙醇含量的内标法 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：基于SHS结合GCMS分析技术构建测定白酒酒醅中乙醇含量的内标法 1 1、材料与方法 2 2、结果与分析 3 3、结论 5 文2：酸牛奶中挥发性成分的GCMS分析 6 1 材料与方法 7 2 结果与分析 8 3 结论 10 参考文摘引言： 11 原创性声明（模板） 12 文章致谢（模板） 12 正文 基于SHS结合GCMS分析技术构建测定白酒酒醅中乙醇含量的内标法 文1：基于SHS结合GCMS分析技术构建测定白酒酒醅中乙醇含量的内标法 静态顶空技术（SHS）是色谱分析挥发性成分和半挥发性成分特有的进样方法[1]，其免除了繁杂的样品前处理过程，具有操作简单、花费少、易于自动化的优点，现已广泛运用于酿造、食品、医学检验等行业[1，2，3，4，5，6，7] 白酒发酵是自然接种、多菌种参与、开放式、长周期的固态发酵。控制发酵的前置条件，如淀粉、水分、酸度、温度等，对维持发酵启动微生物菌群结构稳定、后续发酵过程微生物演替、代谢物质的形成、风味物质的转化至关重要。但一旦进入窖池进行酒精发酵，只能通过监控发酵过程中相关指标，来了解、掌握整个发酵的状态。酒醅中的乙醇含量作为众多监测指标之一[8]，其检测方法依然以传统蒸馏法为主[9]。近年来，气相色谱法、质谱法、顶空进样等以及结合其他检测方法的普遍使用，为酒醅中乙醇等挥发性成分的检测分析提供了简便、快捷、准确的新方法[9，10，11，12，13，14，15]，对指导白酒酿造生产具有很重要的意义。 本研究利用静态顶空进样技术结合气相色谱质谱联用（GC-MS）技术，建立一种内标法测定白酒酒醅中乙醇含量的方法，为白酒酿造过程中乙醇指标监控提供新的检测途径。 1、材料与方法 材料、试剂及仪器 样品：白酒酒醅，由安徽宣酒集团股份有限公司提供。 试剂：无水乙醇（分析纯，%），购自国药集团化学试剂有限公司；叔戊醇（≥%），购自上海阿拉丁生化科技股份有限公司；其他试剂为分析纯，均购自于国药集团化学试剂有限公司。 仪器设备：7697A型静态顶空进样器，美国Agilent公司；GC7890B-MS5977A型气相色谱-质谱联用仪，美国Agilent公司；Aquapro2S超纯水机，美国艾科浦国际有限公司；ME204E/02电子天平，上海梅特勒-托利多仪器有限公司。 试验方法 以无水乙醇为标准品与蒸煮后冷却的超纯水配制%vol、%vol、%vol、%vol、%vol、%vol的乙醇系列标准溶液；叔戊醇为内标，内标浓度为5mL/L。 称取2g白酒酒醅样品于20mL顶空瓶中，加入10μL内标标准液和2mL经蒸煮后冷却的超纯水，漩涡振荡1min后置于静态顶空进样器中，待分析。 顶空进样器条件：孵育温度45℃，孵育时间2min，顶空进样时间。 气相色谱分析条件：色谱柱：VF-WAXms(30m×250μm×μm）；进样口温度：160℃；载气为He（≥%），分流比为100∶1，流速为/min；程序升温条件：40℃保持不变2min，20℃/min至160℃，保持5min。 质谱分析条件：EI离子源，电子能量为，离子源温度230℃，四级杆温度150℃。离子监测（SIM）模式，目标物及内标物定性离子、定量离子、保留时间参考表1。 表1乙醇、叔戊醇的定量离子、定性离子 2、结果与分析 样品预处理优化 酒醅中的乙醇能够在顶空瓶内部体系中得到充分的浸提，在固、液、气三相中达到平衡状态至关重要。实验将酒醅样品分别以直接挥发、蒸馏和浸提3种预处理方式进行分析实验，最终确定以浸提法作为该方法的预处理实验方案，即样品中加入一定量经蒸煮后冷却的超纯水，漩涡振荡后待测。，对样品进行GC-MS分析，见图1。 图1乙醇及内标物SIM模式分析色谱图 注：1—乙醇；2—叔戊醇 上述条件下，乙醇得到有效检出，且色谱峰分离效果好。考虑到固态样本不均一性，选择加一定量的超纯水，漩涡振荡，可使内标在平衡体系中与样品充分混合，优于直接挥发。蒸馏法相对操作复杂，分析效率较低，故未采用。 分析方法的评价 根据所示方法，配制乙醇标准溶液，以乙醇峰和内标峰峰面积的相对响应值为纵坐标，乙醇和内标物相对浓度为横坐标，建立内标法测定白酒酒醅中乙醇含量的标准曲线。结果显示，该方法在既定的浓度范围内具有良好的线性关系（R2），检出限（3S/N）为/100mL。相关参数见表2。 表2乙醇定量方法的线性和检测限 按照酒醅预处理方法，于酒醅中分别添加不同浓度水平（%vol、%vol、%vol）的乙醇标准样品，进行加标回收实验。计算该方法的回收率和相对标准偏差（D），结果见表3。结