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3个划线平板 1个不划线平板 (重复实验) (空白对照) (3)培养 放入37℃恒温箱中培养12h~24h 第31页,共43页,编辑于2022年,星期日 关于微生物的实验室培养公开课 第1页,共43页,编辑于2022年,星期日 一.微生物的类群 微生物 原核类: 真核类 非细胞类: 细菌、支原体、放线菌、蓝藻 个体微小、结构简单 酵母菌、霉菌、食用菌 真菌: 原生生物: 显微藻类、原生动物(如:草履虫、变形虫等) 病毒 ◆微生物的共同特点: 第2页,共43页,编辑于2022年,星期日 1.细菌的形态 第3页,共43页,编辑于2022年,星期日 2.细菌的菌落 ⑴.定义: 单个或者少数细菌在固体培养基上大量繁殖时,会形成一个肉眼可见的、具有一定形态结构的子细胞群体,叫做菌落。 ⑵.特征: 大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等。 ⑶.功能: 每种细菌在一定条件下所形成的菌落,可以作为菌种鉴定的重要依据。 第4页,共43页,编辑于2022年,星期日 几种菌落及其形态 第5页,共43页,编辑于2022年,星期日 1.概念: 人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。 二.培养基 思考:微生物要生存繁殖,需要“吃”什么? 第6页,共43页,编辑于2022年,星期日 2.培养基的营养物质 1.水 2.碳源(提供碳元素的物质) 3.氮源(提供氮元素的物质) 4.无机物(无机盐) 第7页,共43页,编辑于2022年,星期日 3.培养基的类型 (1)按物理状态分:固体培养基 半固体培养基 液体培养基 区别:加入琼脂的量决定培养基的物理状态。 注意:一般细菌不能利用琼脂。 第8页,共43页,编辑于2022年,星期日 单个或者少数微生物在固体培养基表面生长繁殖,可以形成肉眼可见子细胞的群体——菌落 固体培养基用途:用于微生物纯化、计数、鉴定 第9页,共43页,编辑于2022年,星期日 液体培养基:工业生产 表面生长 均匀混浊生长 沉淀生长 第10页,共43页,编辑于2022年,星期日 半固体培养基:观察运动 第11页,共43页,编辑于2022年,星期日 天然培养基 合成培养基 化学成分不恒定的天然有机物 如:牛肉膏蛋白胨培养基、马铃薯培养基 化学成分完全了解的物质配制而成的培养基 (2)按化学成分划分: 第12页,共43页,编辑于2022年,星期日 鉴别培养基 将某种类微生物从混杂的微生物群体中分离出来 用于鉴别不同类型微生物的培养基 选择培养基 (3)按用途划分: 第13页,共43页,编辑于2022年,星期日 选择培养基和鉴别培养基的比较 种类 用途 例子 选择培养基 鉴别培养基 从众多微生物中分离所需的微生物 鉴别不同种类的微生物 不加含碳有机物的无碳培养基, 伊红—美篮培养基使大肠杆菌的菌落呈黑色,可以鉴别大肠杆菌 分离自养型微生物 第14页,共43页,编辑于2022年,星期日 2.无菌范围: 实验操作空间消毒 操作者的手、衣着消毒 实验用具灭菌 实验操作过程 3.无菌的方法: 酒精灯旁操作 三.无菌技术 防止外来杂菌的污染 1.无菌的意义: 消毒与灭菌 第15页,共43页,编辑于2022年,星期日 (1)消毒 (2)灭菌 概念 较为温和理化方法 杀死部分有害微生物 强烈的理化因素 杀死所有的微生物 2.无菌的方法 第16页,共43页,编辑于2022年,星期日 接种室内空气、接种箱、超净工作台 紫外线消毒 实验者的手臂、实验台等 化学药剂消毒 牛奶等不宜高温消毒灭菌的 巴氏消毒 日常食物、罐装食品 煮沸消毒法 适用范围 方法 (1)消毒 第17页,共43页,编辑于2022年,星期日 培养基、实验器材 高压蒸汽灭菌 耐高温需干燥的物品(玻璃器皿等) 干热灭菌 接种的工具、试管口、瓶口 灼烧灭菌 适用对象 灭菌方法 灼烧灭菌 干热灭菌箱 高压蒸汽灭菌锅 (2)灭菌 第18页,共43页,编辑于2022年,星期日 请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要,请选择合适的方法。 (1) 培养细菌用的培养基与培养皿 (2) 玻璃棒、试管、烧瓶 (3) 实验操作者的双手 思考 答:(1)、(2)需要灭菌;(3)需要消毒。 第19页,共43页,编辑于2022年,星期日 我们已经对培养基和无菌技术有了一定的了解, 你能不能用培养基进行大肠杆菌的纯化培养? 思考 第20页,共43页,编辑于2022年,星期日 大肠杆菌的纯化培养: (一)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 四. 实验操作 (二)纯化大肠杆菌 第21页,共43页,编辑于2022年,星期日 1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的配方 H2O 定容至1000ml Nacl
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