微生物的实验室培养原创.pptVIP

⑵稀释涂布平板法： a.梯度稀释菌液： b.涂布平板： 滴稀释菌液 不超过0.1ml 各梯度分别涂布3个平板 1个不涂布作空白对照 稀释103倍 稀释104倍 稀释105倍 第30页，共38页，编辑于2022年，星期日 第31页，共38页，编辑于2022年，星期日 关于微生物的实验室培养原创 第1页，共38页，编辑于2022年，星期日 微生物的类群 原生生物： 原核生物: 真菌: 病毒: 如酵母菌 单细胞的动植物 如草履虫、单细胞藻类等 微生物包含了除植物界和动物界以外的所有生物 无细胞结构 真核细胞 细菌、蓝藻 原核细胞 第2页，共38页，编辑于2022年，星期日 课题1 微生物的实验室培养 第3页，共38页，编辑于2022年，星期日 一.培养基： 1.基本成分： 碳源、氮源、水、无机盐 ⑴碳源 无机碳源： 有机碳源： CO2、CO32-、HCO3- 牛肉膏、蛋白胨等 自养 异养 ⑵氮源 无机氮源： 有机氮源： NH4＋、NO3- 牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等 注：含CHON的有机物是异养型微生物的碳源、氮源、能源 对 不同需要，配置供生长繁殖的营养基质 营养物质 “吃”什么？ 第4页，共38页，编辑于2022年，星期日 一.培养基： 微生物生存的环境和营养物质 2.特殊营养： 生长因子（维生素、碱基等） （牛肉膏、酵母膏、蛋白胨） 3.pH、氧气的需求： 4.种类： 固体培养基 液体培养基 有无 凝固剂琼脂 分离 鉴定 工业 生产 细菌偏碱，真菌偏酸 第5页，共38页，编辑于2022年，星期日 牛肉膏蛋白胨培养基配方( 最广泛)1000ml H2O 定容至1000ml Nacl 5g 蛋白胨 10g 牛肉膏 5g 琼脂20.0g 第6页，共38页，编辑于2022年，星期日 5. 配制原则 ⑴目的明确： ⑵营养全面、浓度适宜、比例恰当 ⑶适宜的pH值： 有机碳源 异养型： 根据微生物的种类、培养目的选择原料 自养型： 不加碳源 加入缓冲剂 细菌偏碱，真菌偏酸 （CO2碳源） 生产 科研 第7页，共38页，编辑于2022年，星期日 1、关于微生物的营养，说法正确的是 A、同一种物质不可能既作碳源又作氮源 B、凡是碳源都能提供能量 C、除水外的无机物仅提供无机盐 D、无机氮源也能提供能量 答案：D 2、自养微生物和异养微生物最常用的碳源分别是 A、CO2和CO2 B、CO2和碳酸盐 C、碳酸氢钠和含碳有机物 D、CO2和含碳有机物 答案：D 第8页，共38页，编辑于2022年，星期日 一）内容： 1、对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行 2、将用于微生物培养的器皿、接种用具、培养基进行 3、为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在 附近进行 4、实验操作时应避免 二.无菌技术： 防止外来杂菌的污染 关键技术是什么？ 清洁和消毒 灭菌 酒精灯火焰 已经灭菌处理的材料和用具与周围的物品接触 超净工作台 第9页，共38页，编辑于2022年，星期日 耐高温需保持干燥的 物品，160～170℃ 1～2小时 接种环、接种针等 金属用具 70~75℃、30min 80℃、15min 100℃、5~6min 消毒 灭菌 定义 方法 较为温和理化方法， 杀死部分有害菌体 （不包括芽孢、孢子） 强烈的理化方法， 杀死所有微生物 （包括芽孢、孢子） 煮沸消毒法（日常） 巴氏消毒法（如：牛奶） 化学药剂 紫外线 灼烧灭菌 干热灭菌（玻璃器皿） 酒精、氯气、石炭酸等 高压蒸汽灭菌 培养基， 100KPa、 121℃、15～30min 二.无菌技术： 防止外来杂菌的污染 .二）消毒与灭菌的区别： 第10页，共38页，编辑于2022年，星期日 芽孢 在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做芽孢。对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。煮沸3小时才死。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌. 第11页，共38页，编辑于2022年，星期日 孢子 在生物体的一定部位产生一种特殊的生殖细胞叫孢子。孢子的特点是能直接长成新个体。