微生物遗传变异 (2).pptVIP

原核微生物的基因重组（二）转导（transduction ） 通过缺陷型噬菌体或温和型噬菌体为媒介，将供体细菌细胞中DNA 片段携带到受体细菌细胞中，从而使受体细菌获得供体细菌的某些遗传性状的现象，称为转导。 根据媒介噬菌体的不同，转导分普遍性转导和局限性转导两类。 1．普遍性转导 由缺陷型噬菌体误包（而非整合）供体细菌DNA 中的任何一部分片段（包括核外遗传物质在内）后，当它再次感染受体细菌时，使后者获得了这部分遗传性状的现象，称为普遍性转导。它的转导频率为 10-5～10-8。 2．局限性转导 由温和噬菌体侵染而形成的某一溶源细菌群被诱导裂解时，其中极少数个体的DNA 可能与噬菌体DNA 发生若干特定基因的交换，从而被整合到噬菌体的基因组上，当该噬菌体再次感染受体细菌时，就使受体细菌获得了这一特定遗传性状的现象，称为局限性转导，它的转导频率为10-4~ 10-6。 第63页，共109页，编辑于2022年，星期日 普遍性转导( generalized transduction) 第64页，共109页，编辑于2022年，星期日 原核微生物的基因重组（三）接合（conjugation ） 通过供体细菌和受体细菌完整细胞间的直接接触而传递大段DNA 的过程，称为接合（有时也称杂交）。 在细菌中，接合现象研究最清楚的是大肠杆菌。发现能够进行接合现象的大肠杆菌有雄性与雌性之分，而决定它们性别的是由是否存在 F 因子所决定。 F因子又称致育因子，是一种质粒，分子量为 5×107 道尔顿。 第65页，共109页，编辑于2022年，星期日 雌性细菌不含F 因子，称为F - 菌株， 雄性细菌含有游离存在的F 因子，称为F + 菌株， 当雄性细菌细胞中所含的F 因子被整合在细胞核的DNA 上，不呈游离状态存在称为Hfr 菌株（高频重组菌株）； 有时被整合在细胞核DNA 上的F 因子，从DNA上面脱落下来，呈游离存在，但在脱落时，F 因子有时能带一小段细胞核 DNA。我们将这种含有游离存在的但又带有一小段细胞核DNA 的F 因子的细菌称为 F′菌株。 第66页，共109页，编辑于2022年，星期日 接合：是细菌通过性菌毛相互连接沟通，将遗传物质（主要是质粒DNA）从供体菌转移给受体菌。 第67页，共109页，编辑于2022年，星期日 第68页，共109页，编辑于2022年，星期日 第69页，共109页，编辑于2022年，星期日 第70页，共109页，编辑于2022年，星期日 第71页，共109页，编辑于2022年，星期日 第72页，共109页，编辑于2022年，星期日 原核微生物的基因重组（四）原生质体融合 通过人为方法，使遗传性状不同的两细胞的原生质体发生融合，并产生重组子的过程，称为原生质体融合或细胞融合。 第73页，共109页，编辑于2022年，星期日 原生质体融合的一般原理和主要过程 先准备两个有选择性遗传标记的突变株，在高渗溶液中，用适当的脱壁酶(如细菌可用溶菌酶或青霉素处理，放线菌可用溶菌酶或相应的脱壁酶，真菌可用蜗牛酶或相应的脱壁酶等)去除细胞壁，再将形成的原生质体离心聚集，并加入促融合剂PEG(聚乙二醇)促进融合，然后在高渗溶液中稀释，涂在能使其再生细胞壁 或进行分裂的培养基上，待形成菌落后，通过影印接种法，将其接种到各种选择性培养基上，最后鉴定它们是否是重组子 第74页，共109页，编辑于2022年，星期日 原生质体融合育种 细胞（A+B—） 细胞（A—B+） 脱壁处理 脱壁处理 原生质体（A+B—） 原生质体（A—B+） 混合 ? 加融合剂 原生质体融合 检出重组子菌落（A+B+） 涂平板（原生质体再生） 形成菌落 第75页，共109页，编辑于2022年，星期日 第76页，共109页，编辑于2022年，星期日 原核微生物的基因重组（五）溶源性转变 宿主菌在感染温和噬菌体后，由于噬菌体DNA整合到核DNA后，导致宿主菌某些新的遗传性状表达，即所谓溶源性转变。 这是一种与转导相似但又有本质不同的现象。首先是它的温和噬菌体不携带有任何供体菌的基因，其次这种噬菌体是正常的完整的，而不是异常情况下产生的缺陷型噬