微生物的生长繁殖 (2).pptVIP

* 大肠杆菌在不同温度下的代时 温度（℃） 代时（min） 温度（℃） 代时（min） 10 15 20 25 30 860 120 90 40 29 35 40 45 47.5 22 17.5 20 77 第30页，共72页，编辑于2022年，星期日 * 3、稳定期 表现：新增殖细胞数与老细胞的死亡数几乎相等，活菌数动态平衡。 特点：生长速率又趋于0，细胞总数最高。合成各类次生代谢物。 原因：养分减少；营养物比例失调，有毒代谢物产生，培养环境条件中pH和氧化还原电位等对细菌生长不利。 第31页，共72页，编辑于2022年，星期日 * 应用意义： 1）发酵生产形成的重要时期（维生素、氨基酸等），生产上应尽量延长此期，提高产量，措施如下： 补充营养物质（补料） 调pH 调整温度 2）稳定期细胞数目及产物积累达到最高。 第32页，共72页，编辑于2022年，星期日 * 4、衰亡期 表现：出现 “负生长 ”，有些细胞开始自溶。衰亡期特点：细菌代谢活性降低，细菌衰老并出现自溶，产生或释放出一些产物，如氨基酸、转化酶、外肽酶或抗生素等。 细胞呈现多种形态，有时产生畸形，细胞大小悬殊，有些革兰氏染色反应阳性菌变成阴性反应等。 第33页，共72页，编辑于2022年，星期日 * 二、微生物的连续培养 　 连续培养（continuous culture）：指在微生物的整个培养期间，通过一定的方式使微生物能以恒定的比生长速率生长并能持续生长下去的一种培养方法。 又称开放培养，是相对单批培养、封闭培养而言的。  单批培养（batch culture）或 封闭培养（closed culture）：指将微生物置于一定容积的培养基中，经过培养生长，最后一次收获。典型生长曲线。 第34页，共72页，编辑于2022年，星期日 * 单批培养（封闭培养）：培养基一次加入，不予补充，不再更换。 连续培养：在培养过程中不断的补充营养物质和以同样的速率移出培养物才能实现微生物连续培养。 第35页，共72页，编辑于2022年，星期日 * 连续 培养器 按控制方式分 按培养器的级数分 按细胞状态分 按用途分 内控制（控制菌体密度）：恒浊器 外控制（控制培养液流速、以控制生长速率）：恒化器 单级连续培养器 多级连续培养器 一般连续培养器 固定化细胞连续培养器 实验室科研用：连续培养器 发酵生产用：连续发酵罐 连续培养器的类型 第36页，共72页，编辑于2022年，星期日 * 概念：是一种根据培养器内微生物的生长密度，并借光电控制系统来控制培养液流速，以取得菌体密度高、生长速度恒定的微生物细胞的连续培养器。 原理：通过调节新鲜培养基流入的速度和培养物流出的速度来维持菌浓度不变,即浊度不变。主要采用恒浊器，当浊度高时，使新鲜培养基的流速加快，浊度降低，则减慢培养基的流速。 特点：基质过量，微生物始终以最高速率进行生长，并可在允许范围内控制不同的菌体密度；但工艺复杂，烦琐。 1、连续培养技术——恒浊培养 使用范围：用于生产大量菌体、生产与菌体生长相平行的某些代谢产物，如乳酸、乙醇等。 第37页，共72页，编辑于2022年，星期日 * 恒浊连续培养 测定所培养微生物的光密度值 自动调节新鲜培养基流入和培养物流出培养室的流速 使培养物维持在某一恒定浊度 当培养室中的浊度超过预期数值时，流速加快，使浊度降低； 当培养室中的浊度低于预期数值时，流速减慢，使浊度升高； 恒浊培养器的工作精度是由光电控制系统的灵敏度来决定的 如果所用培养基中有过量的必需营养物，就可以使菌体维持最高的生长速率。 第38页，共72页，编辑于2022年，星期日 * 一般用于菌体以及与菌体生长平行的代谢产物生产的发酵工业 使用范围：用于生产大量菌体、生产与菌体生长相平行的某些代谢产物，如乳酸、乙醇等。 第39页，共72页，编辑于2022年，星期日 * 2、连续培养技术——恒化连续培养 概念：以恒定流速使营养物质浓度恒定而保持细菌生长速率恒定的方法。 原理：通过控制某一种营养物浓度（如碳、氮源、生长因子等） ，使其始终成为生长限制因子，而达到控制培养液流速保持不变，并使微生物始终在低于其最高生长速率条件下进行生长繁殖。 特点：维持营养成分的亚适量，控制微生物生长速率。菌体生长速率恒定，菌体均一、密度稳定，产量低于最高菌体产量。 应用范围：实验室科学研究 第40页，共72页，编辑于2022年，星期日 * 恒化连续培养： 使培养液流速保持不变，并使微生物始终在低于其最高生长速率下进行生长繁殖。 第41页，共72页，编辑于2022年，星期日 * 装置 控制对象 培养基 培养基流速 生长速率 产物 应用范围 恒浊器 菌体