宫颈癌组织中HippoYes相关YAP1的表达及临床意义.docVIP

宫颈癌组织中HippoYes相关YAP1的表达及临床意义 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：宫颈癌组织中HippoYes相关YAP1的表达及临床意义 1 1、资料与方法 2 2、结果 3 3、讨论 5 文2：芳香化酶P450ERβ在宫颈癌组织的表达及临床意义 6 1 材料与方法 8 2 结 果 9 3 讨 论 9 参考文摘引言： 12 原创性声明（模板） 13 文章致谢（模板） 13 正文 宫颈癌组织中HippoYes相关YAP1的表达及临床意义 文1：宫颈癌组织中HippoYes相关YAP1的表达及临床意义 人乳头瘤病毒感染为宫颈癌发病的根本原因，而宫颈癌发病是一个复杂的过程，其发病机制尚不十分清楚。随着研究的不断深入，人们逐渐认识到宫颈癌的发病是一个多因素、多步骤共同导致的过程，从正常宫颈发展到宫颈上皮内瘤变，再发展为宫颈癌。在这个过程中，原癌基因激活和抑癌基因突变或缺失发挥重要作用。关于原癌基因和抑癌基因变化的研究是宫颈癌发病机制研究的热点。Hippo信号通路为恶性肿瘤的抑制通路，在恶性肿瘤发病中发挥重要作用[1]，Hippo-Yes相关蛋白1位于该通路下游，为Hippo通路转录共激活因子[2]，参与生长、发育及DNA修复等过程，在结直肠癌、卵巢癌等多种恶性肿瘤中表达升高，发挥抑癌基因的角色[3]。本文对宫颈癌组织中YAP1表达进行研究，探讨其临床意义。 1、资料与方法 一般资料 选取2013年1月—2019年6月杭州市妇产科医院和慈溪市妇幼保健院收治的100例宫颈癌患者的宫颈癌组织作为宫颈癌组，100例宫颈CIN患者的宫颈组织作为CIN组，100例子宫肌瘤患者的正常宫颈组织作为正常组。宫颈癌组年龄(±)岁;临床分期:Ⅰ期58例，Ⅱ期42例;鳞癌69例、腺癌31例;低分化19例，中分化42例，高分化39例;宫旁浸润深度:≤1/3者31例，1/3者69例;神经脉管浸润67例;宫旁浸润65例;淋巴结转移53例。CIN组年龄(±)岁，正常组年龄(±)岁。纳入标准:①正常组选自子宫肌瘤行全子宫切除术患者，病理证实宫颈组织正常;②CIN组选自宫颈锥切患者，病理证实为宫颈CIN;③宫颈癌组为行广泛性子宫切除术+盆腔淋巴结切除术患者，病理证实为宫颈癌;④3组均临床资料完整、依从性好、接受正规治疗和随访，以及足够样本量进行免疫组织化学染色。排除标准:①其他恶性肿瘤;②随访过程中失访;③宫颈癌复发;④既往接受放化疗等其他治疗。本研究通过医院伦理委员会批准，患者及其家属知情同意。3组年龄比较，差异无统计学意义(P) 方法 鼠抗人YAP1单克隆抗体购自美国Epitomics公司，二抗购自上海罗氏有限公司，DAB显色剂购自上海罗氏有限公司。 将3组宫颈组织石蜡切片经烤箱烘烤1h，二甲苯脱蜡，梯度酒精脱水，柠檬酸缓冲液高温修复抗原，过氧化氢孵育10min，加入一抗。兔抗人YAP1单克隆抗体(1∶400)过夜孵育，加入二抗(1∶2000)孵育1h，DAB显色，HE染色1min，盐酸乙醇分化30s，氨水返蓝1min，常规脱水、透明、封固。阴性对照以PBS代替一抗。结果判断:YAP1阳性产物主要位于细胞浆和细胞核。①染色程度:无染色计0分;淡黄色计1分;棕黄色计2分;棕褐色计3分。②阳性细胞率:≤5%计0分;5%～25%计1分;25%～50%计2分;50%～75%计3分;75%计6分。染色程度和阳性细胞染色率相乘得到总分:总分0～2分为阴性;总分≥3分为阳性[4] 随访 定期进行门诊或电话随访了解患者预后，随访开始时间为宫颈癌手术日期，随访截止时间为2019年12月31日或死亡时间。无病生存期(disease-freesurvival，DFS)为手术日期至出现远处转移、复发、死亡或随访截止时间;总生存期(totalsurvival，OS)为手术日期至死亡或随访截止时间。 统计学方法 数据分析采用统计软件。计数资料以率(%)表示，比较用χ2检验;Kaplan-Meie法绘制生存曲线，比较用Log-rankχ2检验;预后影响因素用多因素Cox比例风险模型，P为差异有统计学意义。 2、结果 各组宫颈组织中YAP1蛋白阳性表达率比较 正常组、CIN组、宫颈癌组宫颈组织中YAP1蛋白阳性表达率分别为13%、42%和78%，经χ2检验，差异有统计学意义(χ2=，P=)，CIN组、宫颈癌组高于正常组(P)，且宫颈癌组高于CIN组(P)。见图1。 图1各组宫颈组织染色（×400) 不同因素的宫颈癌组织中YAP1蛋白阳性表达率比较 不同临床分期和有无淋巴结转移患者宫颈癌组织中YAP1蛋白阳性表达率比较，经χ2检验，差异有统计学意义()。见表1。 表1不同因素