白杨素对PI3KAkt通路及人白血病细胞柔红霉素化疗敏感性的影响.docVIP

白杨素对PI3KAkt通路及人白血病细胞柔红霉素化疗敏感性的影响 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：白杨素对PI3KAkt通路及人白血病细胞柔红霉素化疗敏感性的影响 1 1、材料与方法 3 2、结果 5 3、讨论 7 文2：冬凌草甲素作用PI3KAKT通路诱导HeLa细胞凋亡 9 1 材料与方法 10 1. 1 细胞培养 10 1. 3 细胞生长率测定 11 1. 4 流式细胞仪检测HeLa细胞凋亡率 11 2 结 果 12 2. 1 冬凌草甲素诱导细胞凋亡的形态变化 12 3 讨 论 14 参考文摘引言： 16 原创性声明（模板） 17 文章致谢（模板） 18 正文 白杨素对PI3KAkt通路及人白血病细胞柔红霉素化疗敏感性的影响 文1：白杨素对PI3KAkt通路及人白血病细胞柔红霉素化疗敏感性的影响 化疗是通过化学药物治疗恶性肿瘤的启动、促进和演进3个阶段的常见治疗方案[1]。使细胞从正常细胞转化为高增殖性癌细胞的多个过程涉及多种基因、信号转导和代谢反应，因此，对肿瘤细胞增殖和侵润的控制应通过多目标疗法和单靶点疗法加以调节[2]。然而，目前治疗恶性肿瘤的两个主要问题是:(1)药物对正常组织的毒性;(2)耐药肿瘤细胞的发育。以黄酮类化合物为代表的天然多酚类化合物对癌细胞有较强的选择性，与其他药物相比，药品不良反应小[3]。在所有的抗肿瘤药物中，以药用植物为基础的天然多酚类化合物通过作用于细胞凋亡相关的多个通路靶点诱导多种癌细胞凋亡[4]。有一些研究报道黄酮类化合物可抑制肿瘤细胞增殖和诱导肿瘤细胞凋亡，可用于治疗白血病[5，6，7] 白杨素(chrysin)属于一种在自然界广泛分布的黄酮类化合物，别名为5，7-二羟基黄酮，主要存在于西番莲、蜂蜜和蜂胶中，是一种潜在用于治疗和预防肿瘤细胞增殖和侵润的药物。白杨素主要通过反向抑制宫颈癌、乳腺癌、甲状腺癌、白血病、前列腺癌、肺癌和结肠癌细胞的增殖、迁移、侵袭和血管生成诱导肿瘤细胞凋亡来发挥抗肿瘤作用[8，9，10]。近年来的多项研究表明，白杨素可诱导A375、HeLa和U937癌细胞凋亡[11，12]。在大多数被检测的癌细胞中，白杨素抑制细胞增殖并诱导凋亡，其作用机制主要是激活含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)和失活丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Akt)生存信号通路[13]。有研究提出在人卵巢癌细胞中，白杨素诱导的肿瘤细胞凋亡是通过激活磷酸肌醇-3激酶(PI3K)/Akt和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路途径介导的[14] 而目前白杨素通过PI3K/Akt信号通路诱导白血病HL-60细胞凋亡相关研究较少，本研究以人急性粒细胞性白血病细胞株(HL-60)为研究对象，研究了白杨素联合柔红霉素诱导体外培养的急性粒细胞性白血病细胞株(HL-60)的细胞凋亡作用，并通过白杨素与柔红霉素联用，观察白杨素通过PI3K/Akt信号通路增加HL-60对柔红霉素的增敏作用。 1、材料与方法 仪器与试药 MCO-175型二氧化碳培养箱(日本三洋公司);Bio-RadM450型酶标仪(美国伯乐公司);BX51型荧光显微镜(日本Olympus公司) 白杨素(纯度95%，批号:95082)、柔红霉素(纯度98%，批号:)均购于Sigma-Aldrich公司，临用前用RPMI-1640培养液稀释至终浓度;RPMI-1640培养基(批号:ZQ-212)、胎牛血清(批号:190419)均购于美国GibcobrL公司;MTT试剂盒(罗氏公司，批号:);S期激酶相关蛋白2(Skp-2，批号:D2274)、P27(批号:G3153)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2，批号:B1527)、Bcl-2相关X蛋白(Bax，批号:E2791)和β-actin单克隆抗体(批号:D2274)、GAPDH抗体(批号:D2274)均购于美国SantaCruz公司;PCR相关试剂盒(天根公司，批号:21-0200-8);谷氨酰胺(国药集团化学试剂有限公司，批号:);青霉素G(武汉大华伟业医药化工有限公司，批号:F);链霉素(哈尔滨生物制品二厂有限责任公司，批号:);SDS-聚丙烯酰胺凝胶(碧云天公司批号:P0012A);引物由南京金斯瑞公司合成。 细胞株 人急性粒细胞性白血病细胞(HL-60)(中科院上海生命科学院，批号:FS-XB1667) 方法 -60细胞培养 人急性粒细胞性白血病细胞(HL-60)在RPMI-1640、2mmol·L-1L-谷氨酰胺、100u青霉素和100μg·ml-1链霉素+10%热灭活胎牛血清的培养基中保存培养。 -60细胞增殖