温阳平喘方对对哮喘脾阳虚证小鼠血清中相关炎性细胞因子水平的影响.docVIP

温阳平喘方对对哮喘脾阳虚证小鼠血清中相关炎性细胞因子水平的影响 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：温阳平喘方对对哮喘脾阳虚证小鼠血清中相关炎性细胞因子水平的影响 1 1、实验材料 2 2、实验方法 3 3、结果 5 4、讨论 6 文2：急性脑梗死患者血清中IL 8 1 资料与方法 8 12 研究方法 9 2 结果 9 3 讨论 9 参考文摘引言： 10 原创性声明（模板） 12 文章致谢（模板） 12 正文 温阳平喘方对对哮喘脾阳虚证小鼠血清中相关炎性细胞因子水平的影响 文1：温阳平喘方对对哮喘脾阳虚证小鼠血清中相关炎性细胞因子水平的影响 海派中医徐氏儿科是上海本土医派，并形成了具有自身学术特点的流派体系。徐氏儿科对小儿肺系疾病中阳虚证者善于运用温阳法，经历代传承，形成了“温阳扶正”的治疗体系，强调其在儿科治疗中的重要性。小儿脾胃虚弱、乳食易伤，患病后易于传变，而脾胃乃后天之本，只有在脾运旺盛、命火充盛的条件下，才能充分得水谷之养以壮形体，得阳和之气以资温煦[1] 此前针对平喘方治疗哮喘的作用机制，我们开展了一系列实验研究，结果表明，平喘方可能通过对哮喘免疫失衡与气道炎症、气道重塑、神经源性炎症等多个方面发挥作用[2，3，4，5]。因此，温阳平喘方取徐氏儿科温培法经验方剂——徐氏理中四逆复方，并在平喘方基础上去黄芩、地龙干，加党参、白术、干姜、炙甘草、制附片等组成，主治阳虚哮喘。通过研究温阳平喘方对哮喘脾阳虚证小鼠模型免疫球蛋白E(IgE)、胃泌素(Gas)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、神经生长因子(NGF)和酪氨酸激酶A(TrkA)的影响，探讨其对小鼠炎症水平的影响，为儿童哮喘的发病机制提供新的理论依据。 1、实验材料 动物 雌性BALB/c小鼠60只，体质量(18±2g)，3～5周龄，购于上海斯莱克实验动物有限责任公司，实验动物许可证号:SCXK2017-0005。按照SPF级饲养标准进行饲养，饲养于上海中医药大学附属市中医医院实验中心，温度及湿度由全自动系统调节，通风良好，自由饮水与进食。 主要试剂与仪器 卵清白蛋白(OVA，Sigma，批号A5503)，氢氧化铝(Thermo，批号77161)，IgE、Gas、TNF-α、NGF、TrkA酶联免疫分析试剂盒(上海信裕生物科技有限公司，批号分别为XY-A545Mu、XY-B224Mu、XY-E20220、XY-E20204、XY-E26595);酶标仪(芬兰雷勃公司，型号MK3);旋转蒸发仪(HTLAB，型号RE-2000A) 实验药物 方药组成:炙麻黄、苦杏仁、紫苏子、花椒目、桃仁、炙甘草、制附片、白术、党参、干姜，按1∶2∶2∶2∶1∶2∶1∶2∶2∶1比例配置。以上药物均购于上海万仕诚国药制品有限公司。煎煮提取方法参考文献[6]方法制备浸膏。按照中药浓度所含原生药量/mL计算。水煎2次，提取药液。第1次加入6倍水武火煮沸后，文火煮30min，将药液滤出;第2次加入5倍水武火煮沸后，文火煮30min，将药液滤出。将2次药液混合后，用旋转蒸发仪浓缩至流浸膏样，放于4℃环境中储存备用，每次灌胃前复温备用。具体操作由上海中医药大学附属市中医医院实验中心完成。 醋酸地塞米松片(上海信谊药厂有限公司，国药准字号H，规格每片)。以蒸馏水将地塞米松片剂配置成浓度为/mL，现用现配。 2、实验方法 动物分组 将60只小鼠按体质量随机分为空白组、模型组、温阳平喘方低剂量组(简称低剂量组)、温阳平喘方中剂量组(简称中剂量组)、温阳平喘方高剂量组(简称高剂量组)、地塞米松组(简称地米组)，共6组，每组10只。 模型建立 以文献[7，8]造模方法为基础，结合课题组前期摸索的较为成熟的造模条件及剂量进行造模。以“饮食劳倦则伤脾、苦寒泻下则损阳”的理论复制脾阳虚证小鼠模型，除空白组外，其余各组小鼠连续10d采用饮食不节、过度劳倦和苦寒泄下等多种因素共同作用。具体方法:饮食不节，即不规律饮食，指每日上午8∶00给食，下午8∶00撤食;过度劳倦，在27℃温水中游泳至耐力极限(指无力游动，经驱赶仍不能继续，身体出现向腹侧弯曲、发抖、欲溺水等征象)，每日1次;苦寒泻下，单日大黄水煎剂/20g灌胃。在脾阳虚证小鼠模型造模成功后，使用OVA致敏和雾化吸入激发的方法建立哮喘模型。除空白组外，其余各组小鼠分别于第11天和第25天以%氯化钠溶液将5gOVA和(OH)3制成10%致敏液，按1mL/20g行腹腔注射致敏;第33～39天，将各组小鼠置于5L密闭容器中，以5%OVA生理盐水，由超声雾化器雾化吸入40min，激发哮喘，每日1次，共7d。空白组以等量生理盐水行腹腔注射及雾化吸入。