研究制备功能性消化不良成年小鼠模型的方法.docVIP

研究制备功能性消化不良成年小鼠模型的方法 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：研究制备功能性消化不良成年小鼠模型的方法 1 1、材料和方法 2 2、结果 4 3讨论Discussion 5 文2：脱甲基制备大黄素的方法比较 7 1 实验部分 8 2 结果 9 3 讨 论 10 参考文摘引言： 11 原创性声明（模板） 12 文章致谢（模板） 12 正文 研究制备功能性消化不良成年小鼠模型的方法 文1：研究制备功能性消化不良成年小鼠模型的方法 文题释义： 间日给食：是指连续两次给食时间间隔24h，使得实验鼠不能正常饮食，是一种在实验过程中喂养方面影响的处理措施，是消化不良实验动物模型制备的常见饲养方法。 功能性消化不良(Functionaldyspepsia，FD)：是指具有上腹部疼痛、胀痛、以及饱腹感、嗳气、食欲不振、恶心、呕吐等多种不适症状，经检查排除引起上述症状的器质性疾病的一组临床综合征。症状可持续或反复发作，频率为过去6个月中，症状发生3个月以上，是临床上最常见的一种功能性胃肠病。 功能性消化不良是消化系统中普遍存在的一种慢性胃肠疾病，由于生活节奏的加快导致此病的发病率逐年升高，但是对于其具体的发病机制还尚未清楚，因而成为研究的热点，故为临床研究提供可靠的动物模型至关重要。目前功能性消化不良大鼠动物模型的制备方法均为单因素刺激，可分为经典的碘乙酰胺法(刺激因素为夹尾激怒)与左旋精氨酸法(左旋精氨酸作为造模刺激药物)[1，2，3，4，5，6，7]；但是联合多因素制备功能性消化不良小鼠动物模型研究还未深入。联合多因素制备功能性消化不良动物模型尝试在短时间内利用成年小鼠制备功能性消化不良模型，除了可以降低单一药物的自愈性，进一步模拟患者疾病特征的真实情况，也是制备成年小鼠功能性消化不良模型的一次探索，为后续临床治疗和用药研究提供一种动物模型基础。 1、材料和方法 设计 随机对照动物实验。 时间及地点 实验于2019年1至7月在承德医学院基础医学研究所完成。 材料 SPF级10周龄，成年昆明种雌性小鼠60只，体质量30-40g，由辽宁长生生物技术有限公司提供，许可证号：SCXK(辽)2015-0003。 、试剂及仪器 活性碳粉(批号：180404，天津欧博凯化工有限公司)；多聚甲醛(批号：，天津市福晨化学试剂厂)；碘乙酰胺(批号：O0920A，美仑生物技术有限公司)；L-精氨酸(批号：F0110A，美仑生物技术有限公司)；大黄饮片(购自北京同仁堂药店)；ShandonExcelsior全自动全封闭组织脱水机(美国Thermo公司)；RM2125RT石蜡切片机(德国Leica公司)；TK-218型恒温摊片烤片机(孝感市泰维电子设备有限公司)；BH-2型OLYMPUS显微镜及摄像装置(日本Olympus公司) 实验方法 60只昆明小鼠编号、称质量，采用随机数字表法分为2组：空白对照组和模型组，每组30只。 每日早上称质量后，空白对照组小鼠每只灌胃2%蔗糖溶液，食水充足持续8d。模型组小鼠每日上午每只给予%碘乙酰胺蔗糖混合溶液，下午在110cm×60cm×40cm长方形水槽中注入10cm高的自来水加温到(22±1)℃，将造模小鼠按分组放入水箱中持续游泳20min，1h后给予左旋精氨酸溶液按/kg灌胃，持续5d，从第6天开始将左旋精氨酸溶液换成冷大黄水煎液，按小鼠体质量/kg持续灌胃3d，其余照常不变。模型组采取间日给食(24h禁食，24h给食)，循环往复共计8d。 主要观察指标 观察并记录造模前后小鼠的皮毛光泽、活动状况，粪便颗粒大小，软硬程度及体质量的变化。 采用差值法测定小鼠的饮水量。每天早8点每笼的水瓶放入纯水150mL，到第2天早8点测量水瓶的存水量，差值与小鼠只数的比值就是一只小鼠的每天饮水量。 每天早8点给予天平称量的定量食物，到第2天早8点称量剩余的食物量，差值与小鼠只数的比值就是一只小鼠的每天饮食量。 造模灌胃最后一次结束禁食24h，给予小鼠碳粉半固体糊(按1∶4的比例勾兑碳粉和花生粉)灌胃，1h后，体积分数4%水合氯醛(/kg)腹腔注射麻醉小鼠，解剖结扎胃贲门及幽门，取完整的胃，用滤纸拭干后称质量此为全胃质量，然后沿胃小弯处剪开胃体，用生理盐水洗去胃内容物并用滤纸沾干后再称质量此为空胃质量，以前后2次称质量的差值用来计算胃排空率。胃排空率=[(全胃质量-空胃质量)/全胃质量]×100% 将自幽门至回盲部取出完整的小肠。用钢尺分别测其全长和碳粉半固体糊在小肠中移动的距离。小肠推进率=碳粉推进长度/小肠总长度×100% 分别取十二指肠、小肠、胃组织放入40g/L多聚甲醛中浸泡固定48h，梯度乙醇脱水，常规石蜡