第五章各类中药分析.ppt

§2 黄酮类成分分析 2.4 含量测定 2.4.1 总黄酮类成分的测定 黄酮类化合物具有特定的紫外吸收Ⅰ带在300～400nm,Ⅱ带在240 ～ 285nm，提纯后可直接测定总黄酮时常用芦丁作对照品。 复杂体系中与金属盐类试剂生成配合物，常用的是氯盐反应，试剂为三氯化铝和硝酸铝。 第三十页，共七十七页。 §2 黄酮类成分分析 2.4 含量测定 2.4.2 单体黄酮成分的含量测定 薄层色谱法 薄层色谱法是测定中药制剂中单体黄酮类成分的关键是分离。样品经有机溶剂或水提取后，可用硅胶、纤维素或聚酰胺进行层析，以达到分离的目的。层析后可TLC-比色法测定；也可以用薄层扫描仪直接测定。 第三十一页，共七十七页。 §2 黄酮类成分分析 2.4 含量测定 2.4.2 单体黄酮成分的含量测定 高效液相色谱法 黄酮类成分的HPLC： a.无羟基的黄酮类化合物或乙酰化黄酮类化合物，固定相为硅胶，流动相可套用薄层色谱条件，但极性要相对小一点。 b.乙酰化黄酮、有一个羟基的黄酮类成分，采用-CN键合相色谱，流动相为乙烷-氯仿。 第三十二页，共七十七页。 §2 黄酮类成分分析 2.4 含量测定 2.4.2 单体黄酮成分的含量测定 高效液相色谱法 黄酮类成分的HPLC： c.含有2个以上羟基的黄酮类成分可选用-NH2键合相，流动相可选用二氧六环-二氯甲烷(1∶9)。 黄酮类成分的Rp-HPLC： 大多用C18键合相，流动相常用甲醇-水-乙酸(或磷酸缓冲液)及乙腈-水。 第三十三页，共七十七页。 §3 三萜皂甙类成分分析 3.1 概述 3.2 理化性质 物理性状（存在的形态，表面活性，吸湿性） 溶解性 紫外光谱特征 大多无明显的紫外吸收或仅在200nm附近有末端吸收 皂甙元—能溶于石油醚、苯、乙醚、氯仿等 皂甙—可溶于水，易溶于热水、含水稀醇等 甘草酸 第三十四页，共七十七页。 §3 三萜皂甙类成分分析 3.3 皂甙类成分的定性分析 3.3.1 泡沫反应 取中药材粉末约1g,加水10ml,煮沸10分钟后过滤,将滤液于试管内强烈振摇,如产生持久性泡沫(15分钟以上)即为阳性反应.所产生的泡沫多少与pH有关,取2支试管,一管加入0.1mol/L盐酸液5ml，另一管加入0.1 mol/L氢氧化钠液5ml，再各加入中药水溶液，使酸管的pH为1，碱管pH为13，强烈振摇，如两管所形成的泡沫高度相同，则中药中含三萜皂甙，如碱管泡沫较酸管泡沫高数倍，则中药中含甾体皂甙。 第三十五页，共七十七页。 §3 三萜皂甙类成分分析 3.3.2 薄层色谱鉴别 吸附剂：硅胶、氧化铝、硅藻土 展开剂： 三萜皂甙—氯仿-甲醇-水、正丁醇-醋酸乙酯-水等极性较大的体系 三萜皂甙元--以苯、氯仿、己烷等为主要组分 显色剂 三氯醋酸、50%及10%硫酸乙醇液、磷钼酸、浓硫酸-醋酸酐、碘蒸气等 第三十六页，共七十七页。 样品：1-2．生晒参；3-5．红参；6-9．朝鲜红参；10-12．西洋参(进口)；13-14．西洋参(国产)；15．三七；16．人参皂甙对照品Rb1(S1)，Rb2(S2)，Rc(S3)，Re(S4)，Rd(S5), Rg1(S6)，Rf(S7)，Fll(S8)。 第三十七页，共七十七页。 §3 三萜皂甙类成分分析 3.4 皂甙类成分的定量分析 皂甙类成分的定量分析可分为 总皂苷测定 皂苷元测定 单体皂苷测定 第三十八页，共七十七页。 §3 三萜皂甙类成分分析 总皂甙的含量测定 一般需用适当的溶剂提取，如甲醇(80％～95％)、乙醇等，提取后经分离（如水饱和的正丁醇萃取，大孔吸附树脂经处理后溶剂洗脱）得到总皂甙成分，再根据皂甙类化合物的各自特征来选择含量测定方法。最常用的方法是比色法。 第三十九页，共七十七页。 §3 三萜皂甙类成分分析 3.4.1 总皂苷的含量测定 比色法 常利用皂甙能与某些试剂反应后产生颜色，然后于可见光区进行比色测定. 第四十页，共七十七页。 §4 醌类成分分析 4.1 概述 4.2 理化性质 物理性状（存在的形态，升华性，光不稳定性） 溶解性 酸碱性 酚羟基→酸性 游离—溶于乙醇、苯、乙醚、氯仿等 醌甙—可溶于热水，易溶于甲醇、乙醇 大黄素 第四十一页，共七十七页。 §4 醌类成分分析 4.2 理化性质 显色反应 羟基蒽醌+碱→橙，红，紫红，蓝 α-酚羟基或邻二酚羟基结构+Pb2+/Mg2+ →配合物 +对亚硝基二甲基苯胺→紫，绿，蓝，灰 第四十二页，共七十七页。 §4 醌类成分分