自杀基因联合中药治疗肿瘤详解演示文稿.pptVIP

病毒滴度测定及结果 本实验测定滴度最高为1×104cfu/mL 第三十页，共七十四页。 胃癌细胞tk基因的斑点杂交鉴定 1 2 3 胃癌细胞SGC-7901、SGC-7901/tk的 DNA 与tk探针的斑点杂交图 注：1. pLXSN/ tk 质粒DNA（阳性对照）； 2. SGC-7901细胞DNA； 3. SGC-7901/tk细胞DNA 第三十一页，共七十四页。 GCV对人胃癌细胞SGC-7901的体外杀伤试验 第三十二页，共七十四页。 结论及意义 已成功已成功构建了逆转录病毒载体介导的HSV-tk/GCV肿瘤自杀基因治疗系统 HSV- tk/GCV自杀基因治疗系统成功的构建，为后续的研究工作奠定了坚实的基础 第三十三页，共七十四页。 中药方药对肿瘤自杀基因治疗的增效作用 第三十四页，共七十四页。 动物水平实验 第三十五页，共七十四页。 技术路线 H22/tk＋和H22/tk－按1∶4混合 接种小鼠皮下组织 （ 2×106细胞 ） 病毒感染肝癌细胞 疗效观察 动物分组 GCV体外杀伤试验 成瘤后治疗 小鼠移植性肝细胞癌治疗实验(六味地黄) 第三十六页，共七十四页。 分组及治疗 模型对照组 正常对照组 联合治疗组 六味地黄丸治疗组 自杀基因治疗组 （造模） 第2天 第6天 第16天 蒸馏水灌胃每天0.5mL 腹腔注射生理盐水每天0.25mL 蒸馏水灌胃每天0.5mL 腹腔注射生理盐水每天0.25mL 腹腔注射生理盐水每天0.25mL 腹腔注射GCV100mg﹒kg-1﹒d-1 腹腔注射GCV100mg﹒kg-1﹒d-1 六味地黄丸悬液灌胃10g﹒kg-1﹒d-1 蒸馏水灌胃每天0.5mL 六味地黄丸悬液灌胃10g﹒kg-1﹒d-1 （造模） （造模） （造模） （生理盐水） 第三十七页，共七十四页。 肿瘤生长体积曲线 时间（d） 第三十八页，共七十四页。 肿瘤质量及抑瘤率 组别 n 肿瘤质量（g） 抑瘤率（%） 模型对照组 19 1.5825±1.2380 六味地黄治疗组 19 0.8498±0.7163 46.3 自杀基因治疗组 20 0.9904±0.9796 37.4 联合治疗组 18 0.5859±0.3786* 63.0 注：*与模型对照组比较P0.05 抑瘤率=（模型组肿瘤质量－治疗组肿瘤质量）/模型组肿瘤质量×100% 第三十九页，共七十四页。 肿瘤质量图示 第四十页，共七十四页。 病理检查结果(肉眼观察) 注：第二组：肿瘤模型组；第三组：六味地黄丸治疗组；第四组：自杀基因治疗组； 第五组：联合治疗组 第四十一页，共七十四页。 病理检查结果(光镜观察 ) 模型对照组 肿瘤细胞数量较多，密集。 六味地黄丸治疗组 肿瘤细胞数量较多，密集。 自杀基因治疗组 肿瘤细胞数量密度相对较少。 联合治疗组 肿瘤细胞数量密度相对较低。 各组细胞密度 第四十二页，共七十四页。 模型对照组：肿瘤组织内肿瘤细胞坏死，呈核固缩表现，并见大片红染无结构的坏死组织 六味地黄丸治疗组：肿瘤组织内肿瘤细胞坏死，呈核固缩表现，并见大片红染无结构的坏死组织 自杀基因治疗组：肿瘤组织内肿瘤细胞坏死，呈核固缩表现，并见大片红染无结构的坏死组织 联合治疗组：肿瘤组织内肿瘤细胞坏死，呈核固缩表现，并见大片红染无结构的坏死组织。 各组肿瘤坏死情况 第四十三页，共七十四页。 模型对照组：肿瘤周边纤维组织增生不明显，未见明显包膜 六味地黄丸治疗组：肿瘤周边纤维组织增生较明显，形成较明显的假包膜 自杀基因治疗组：肿瘤周边纤维组织增生较明显，形成较明显的假包膜 联合治疗组：肿瘤周边纤维组织增生较明显，形成较厚的假包膜 各组肿瘤纤维结缔组织增生情况 第四十四页，共七十四页。 模型对照组：肿瘤边缘见少量炎细胞浸润 六味地黄丸治疗组：肿瘤边缘纤维结缔组织内见较多量炎细胞浸润 自杀基因治疗组：肿瘤边缘纤维结缔组织内见较多量炎细胞浸润 联合治疗组：肿瘤边缘纤维结缔组织内见大量炎细胞浸润 各组肿瘤组织炎细胞浸润情况 第四十五页，共七十四页。 肝癌治疗实验结论 自杀基因疗法与六味地黄丸联合应用于小鼠移植性肝细胞癌的治疗具有协同效应，表明六味地黄丸对自杀基因治疗小鼠移植性肝细胞癌具有增效作用 第四十六页，共七十四页。 丹参注射液 H22肝癌荷瘤小鼠剥落瘤块照片 A 模型对照组； B 丹参组； C tk/GCV组；