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第2章 细胞工程 ;第2章 细胞工程
第1节 植物细胞工程
授课:谢志强
QQ:408904041;; 一、植物细胞工程的基本技术
理论基础:
细胞全能性 细胞经分裂和分化后,仍然具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能。这种潜能只有在特定的时间和空间条件下,细胞中的基因会选择性地表达。
1.植物组织培养技术
⑴植物组织培养 将离体的植物器官、组织或细胞等,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其形成完整植株的技术。
⑵植物组织培养流程;; 一、植物细胞工程的基本技术
2.植物体细胞杂交技术
⑴植物体细胞杂交 将不同来源的植物体细胞,在一定条件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培育成新植物体的技术
⑵原理 细胞膜流动性(原生质体的融合)、植物细胞的全能性(杂种细胞培养成杂种植物)。
⑶植物体细胞杂交过程(阅读课文第36-37页)
思考1:植物细胞外面有一层细胞壁,这层细胞壁阻碍着细胞间的杂交。如何突破这层障碍?
利用纤维素酶和果胶酶去除这层细胞壁,获得原生质体。
思考2:要借助什么手段让原生质体融合?
物理法:电融合法、离心法;化学法:聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+-高pH融合法。; 一、植物细胞工程的基本技术
2.植物体细胞杂交技术
⑶植物体细胞杂交过程
思考3:植物体细胞融合成功的标志是什么?
再生出新的细胞壁。
思考4:融合后的细胞要经过筛选吗?
如上图,融合后的细胞有3种:AA、AB、BB,所以要筛选。;;; 二、植物细胞工程的应用
1.植物繁殖的新途径
⑴快速繁殖
用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术,称为植物的快速繁殖技术,也叫做微型繁殖技术。它不仅可以高效、快速地实现种苗的大量繁殖,还可以保持优良品种的遗传特性。
⑵作物脱毒
植物顶端分生区附近(如茎尖)的病毒极少,甚至无病毒。因此,切取一定大小的茎尖进行组织培养,再生的植株就有可能不带病毒,从而获得脱毒苗。; 二、植物细胞工程的应用
2.作物新品种的培育
⑴单倍体育种
单倍体育种先通过花药(或花粉)培养获得单倍体植株,然后经过诱导染色体加倍,当年就能培育出遗传性状相对稳定的纯合二倍体植株,这极大地缩短了育种的年限,节约了大量的人力和物力。
大多数单倍体植株的细胞中只含有一套染色体,染色体加倍后得到的植株的隐性性状容易显现,因此它也是进行体细胞诱变育种和研究遗传突变的理想材料。
⑵突变体的利用
在植物的组织培养过程中,由于培养细胞一直处于不断增殖的状态,因此它们容易受到培养条件和诱变因素的影响而产生突变。;;;4.某植物有A、B两品种。科研人员在设计品种A组织培养实验时,参照品种B的最佳激素配比(见下表)进行预实验。
据表回答:
(1)Ⅰ阶段时通常选择茎尖、幼叶等作为外植体,原因是
________________________________________。
(2)在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ阶段中发生基因选择性表达的是____________阶段。
(3)在_____阶段用秋水仙素对材料进行处理,最易获得由单个细胞形成的多倍体。;4.某植物有A、B两品种。科研人员在设计品种A组织培养实验时,参照品种B的最佳激素配比(见下表)进行预实验。
据表回答:
(4)为确定品种A的Ⅰ阶段的最适细胞分裂素浓度,参照品种B的激素配比(m1>2.0),以0.5umol·L-1为梯度,设计5个浓度水平的实验,细胞分裂素最高浓度应设为___________umol·L-1。
(5)Ⅲ阶段时,科研人员分别选用浓度低于或高于n3umol·L-1的生长素处理品种A幼芽都能达到最佳生根效果,原因是处理幼芽时,选用低浓度生长素时的处理方法为____________________,选用高浓度生长素时的处理方法为_____________________。
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