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第1章 发酵工程第2节 微生物的培养技术及应用(一) 酸奶的制作及安全性 向经过杀菌处理的牛奶中添加某些对人体有益的细菌,再经过发酵就可以制成酸奶。自制酸奶虽然方便,但是食用自制酸奶导致肠胃不适的事例屡见不鲜,主要原因是在制作过程中有杂菌混入。 那么?怎样才能保证无处不在的杂菌不混入发酵物中呢? 一、微生物的基本培养技术相关信息============================ 微生物是难以用肉眼观察的微小生物的统称,包括细菌、真菌、病毒及一些原生生物等。发酵工程提及的微生物主要指用于发酵的细菌和真菌。================================ 研究和应用微生物的前提是防止杂菌污染,获得纯净的微生物培养物,也是发酵工程的重要基础。从社会中来 在实验室培养微生物,一方面要为人们需要的微生物提供合适的营养和环境条件;另一方面确保其他微生物无法混入,并将需要的微生物分离出来。 一、微生物的基本培养技术 (一)培养基的配制 1.概念 人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。 2.用途 用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。 3.种类 不含凝固剂(如琼脂)、呈液体状态的培养基为液体培养基,呈固体状态的培养基为固体培养基。 (一)培养基的配制 4.成分 结合右图分析 ①碳源:提供碳元素的物质; ②氮源:提供氮元素的物质; ③水; ④无机盐:磷酸盐、NaCl; ⑤生长因子:维生素 不同微生物培养基的配方各不相同,在提供上述几种主要营养物质的基础上,培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。当然合适的培养温度也是必不可少的。 特殊营养物质:又称作生长因子,是一类微生物正常生长代谢所必需的,而且微生物不能用碳源、氮源自行合成的有机物。广义的生长因子除了维生素外,还包括碱基、生物素和烟酸等,有时还包括氨基酸营养缺陷突变株所需要的氨基酸。组分含量提供的主要营养牛肉膏5g碳源、磷酸盐和维生素等蛋白胨10g氮源和维生素等NaCl5g无机盐H2O定容至1000mL水1000mL牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成 在实验室培养微生物,一方面要为人们需要的微生物提供合适的营养和环境条件;另一方面确保其他微生物无法混入,并将需要的微生物分离出来。 (二)无菌技术 获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。 /////////无菌技术除用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么作用?///////// 1.无菌技术的措施 ①消毒 指使用较为温和的_____、_____或_____等方法杀死物体_____或_____一部分微生物。 ②灭菌 指使用强烈的______方法杀死物体_________的微生物,包括_____和_____。能有效避免操作者被微生物感染。?物理化学生物内部表面理化内外所有芽孢孢子 (二)无菌技术 2.无菌技术的操作内容 对操作的_____、操作者的_____和___进行清洁和消毒;将用于微生物培养的_____、_________和_______等进行灭菌。 3.无菌技术的操作方法 常用的消毒方法有_____消毒、_____消毒等;灭菌方法有_____灭菌、_____灭菌和_____灭菌等。空间衣着手器皿接种用具培养基湿热煮沸巴氏灼烧干热种类常用方法应用范围消毒煮沸100℃煮沸5~6min家庭餐具等生活用品,可杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢巴氏62~65℃消毒30min或80~90℃处理30s~1min一些不耐高温的液体,如牛奶、啤酒,可以杀死绝大多数微生物,并且基本不破坏其营养成分化学药物体积分数为70%~75%的酒精擦拭、碘酒涂抹、氯气喷洒等用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源等紫外线30W紫外线照射30min接种室、接种箱、超净工作台等灭菌湿热100kPa、121℃维持15~30min培养基及多种容器干热干热灭菌箱160~170℃加热2~3h玻璃器皿、金属用具等耐高温、需干燥的物品灼烧酒精灯火焰灼烧接种环、接种针或其他金属用具等,试管口或瓶口 (三)微生物的纯培养 1.几个基本概念 ①培养物 接种于培养基内,在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体。 ②纯培养物 由单一个体繁殖所获得的微生物群体。 ③纯培养 获得纯培养物的过程。包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。探究·实践酵母菌的纯培养 分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体,这就是菌落。采用___________和_______________能将单个微生物分散在固体培养基上,之后经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物。平板划线法稀释涂布平板法酵母菌的纯培养 目
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