氨基酸生产工艺.ppt

3、影响谷氨酸结晶析出的主要因素 P68-70 第62页，共83页，2022年，5月20日，4点53分，星期五 4.离子交换法 工艺流程P72 用阳离子交换树脂吸附谷氨酸形成的阳离子，再用热碱（ 60 ℃ 4% NaOH ）洗脱，收集相应流分，加盐酸结晶。 GA+ GA± GA- GA= 2 3.22 7.0 12 pI 第63页，共83页，2022年，5月20日，4点53分，星期五 谷氨酸是酸性氨基酸，含2个羧基1个氨基，与阴离子交换树脂要比与阳离子交换树脂强，但阴离子机械强度差，价格贵，因而用阳离子交换树脂。 理论上讲发酵液上柱的pH值应低于3.22，但实际上控制在5.0 ? 6.0之间，因Na+、NH4+交换能力谷氨酸，优先交换，置换出H+使pH值低于3.2，使谷氨酸成为阳离子，但不能6.0。 第64页，共83页，2022年，5月20日，4点53分，星期五 影响离子交换的因素 P73 第65页，共83页，2022年，5月20日，4点53分，星期五 谷氨酸发酵研究新进展 继续选育各种生化突变菌株：转化率提高，或可在富含生物素的培养基中保持较高产酸水平。提高原料利用率，拓宽原料来源或简化操作工艺。 生物工程新技术的应用：体外DNA重组的基因工程和原生质体融合技术和固定化细胞技术使产量提高近1倍。 改进发酵工艺：开拓原料，改进流加工艺，通过电子计算机控制发酵条件。 第66页，共83页，2022年，5月20日，4点53分，星期五 非糖质原料的谷氨酸发酵 醋酸发酵谷氨酸 机理：醋酸形成乙酰CoA，再进入TCA，因此凡能利用葡萄糖原料的菌种也可作为醋酸发酵谷氨酸的菌株。 以醋酸钠或醋酸铵与醋酸的混合液为原料，且浓度不超过4％。发酵过程中也需流加以保持pH。 第67页，共83页，2022年，5月20日，4点53分，星期五 2 .氨基酸合成的方式 1.氨基转移作用：转氨酶催化的转氨反应 α-酮戊二酸和其它氨基酸经过转氨酶的作用下使α-酮戊二酸转化成谷氨酸。 2.还原氨基化作用：NH4+供氢体辅酶Ⅱ的存在下α-酮戊二酸在谷氨酸脱氢酶的催化下生成谷氨酸。 3.谷氨酸合成酶催化反应： 第30页，共83页，2022年，5月20日，4点53分，星期五 葡萄糖 中间产物 a－酮戊二酸 谷 氨 酸 谷氨酸脱氢酶 NH4＋ 抑 制 3.谷氨酸的生物合成 第31页，共83页，2022年，5月20日，4点53分，星期五 葡萄糖 6-P-葡萄糖 6-P-葡萄糖酸 3-P-甘油醛 5-P-核糖 丙酮酸 乙酰CoA 草酰乙酸 柠檬酸 苹果酸 异柠檬酸 延胡索酸 琥珀酸 α- 酮戊二酸 谷氨酸 透过细胞膜 谷氨酸 HMP: Hexosemonophosphate pathway 第32页，共83页，2022年，5月20日，4点53分，星期五 第33页，共83页，2022年，5月20日，4点53分，星期五 （1）EMP:丙酮酸，ATP,NADH2 （2）HMP:6－磷酸果糖 3－磷酸甘油酸 NADPH2:?－酮戊二酸还原氨基化必需的供氢体。 （3）TCA循环:生成谷氨酸前体物质?－酮戊二酸。 （4）CO2固定反应:补充草酰乙酸。 （5）乙醛酸循环:使琥铂酸、延胡索酸和苹果酸的量得 到补充，维持TCA循环的正常运转。 谷氨酸脱氢酶 （6）还原氨基化反应:?－酮戊二酸 谷氨酸 丙酮酸 第34页，共83页，2022年，5月20日，4点53分，星期五 4.谷氨酸生产菌的生化特征 （1）有苹果酸酶和丙酮酸羧化酶。 （2）?－酮戊二酸脱氢酶活性弱，异柠檬酸脱氢酶活性强，异柠檬酸裂解酶活性弱。