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第1页/共129页从DNA到蛋白质的基因信息传递分为两个过程:转录(Transcription):生物体以DNA为模板合成RNA的过程,遗传信息从DNA向RNA传递过程,也是基因表达的起始 转录是一种酶促的核苷酸聚合过程,所需的酶叫做依赖DNA的RNA聚合酶(DDRP) 转录产生初级转录物为RNA前体,它们必须经过加工过程变为成熟的RNA,才能表现其生物活性第2页/共129页翻译(Translation):基因的遗传信息在转录过程中从DNA转移到mRNA,再由mRNA将这种遗传信息表达为蛋白质氨基酸序列的过程 蛋白质分子由许多氨基酸组成,不同的蛋白质分子中氨基酸的特定排列顺序,是由蛋白质编码基因中的DNA碱基序列决定的 翻译过程需要200多种生物大分子参加,其中包括核糖体、mRNA、tRNA及多种蛋白质因子第3页/共129页第一节 转录转录的基本概念转录的酶学* 转录过程* 转录后加工与修饰* 第4页/共129页I.转录的基本概念 转录:是一个酶学过程,在依赖DNA的RNA聚合酶的作用下进行;包括识别,起始(Promotion ),延长(Elongation)和终止(Termination)四个过程 转录单位 (Transcriptional unit):一段从启动子(Promoter)开始到终止子(Terminator)结束的DNA序列 原核生物中的转录单位为多顺反子(Polycistron),操纵子(Operon);真核生物中的转录单位为单顺反子(Monocistron),但无操纵子第5页/共129页I.转录的基本概念转录的基本过程模板识别:RNA聚合酶与启动子(能活化RNA聚合酶使之与模板链结合的特定DNA序列)识别结合并使DNA解链的过程起始:产生第一个核苷酸键(到形成9bp短链)延伸:RNA聚合酶催化聚合反应终止:终止信号终止反应第6页/共129页I.转录的基本概念RNA的转录合成只以双链DNA中的一条单链作为的模板进行(不对称转录)转录的不对称性 RNA的合成时,DNA双链中仅有一条链作为转录模板,称为转录的不对称性RNARNAI.转录的基本概念第7页/共129页编码链与模板链转录方向3?5?5?3?编码链模板链转录方向模板链编码链在DNA双链中,与mRNA序列相同的那条DNA单链称为编码链,又叫有意义链;而另一条以碱基互补原则指导mRNA合成的DNA链称为模板链,又叫无意义链模板链并非永远在同一条单链上第8页/共129页II.转录的酶学RNA聚合酶所催化的反应大肠杆菌RNA聚合酶δ因子真核生物RNA聚合酶II.转录的酶学第9页/共129页聚合酶所催化的反应第10页/共129页II.转录的酶学2.大肠杆菌RNA聚合酶全酶分子量达50多万,由五个亚基组成?亚基(1):辨认转录起始点,细胞内转录是在DNA特定的起始点上开始的β亚基(1):酶和核苷酸底物结合的部位,与转录全过程有关(催化)β’亚基(1):酶与DNA模板结合的主要部位(开链),强碱性亚基α亚基(2):位于前端的α因子使双链解链为单链;位于尾端的α因子使单链重新聚合为双链去掉?亚基的部分称为核心酶,核心酶催化核苷酸间磷酸二酯键的形成 第11页/共129页II.转录的酶学因子作用:使全酶识别Sextama盒, 与模板链结合,极大地促进核心酶对启动子序列地结合。是核心酶的别构效应物作用机制:核心酶对DNA的识别位点过多,σ因子降低核心酶对一般DNA的结合常数,提高对启动子的结合常数一核多σ:同一核心酶搭配不同的σ因子故而可识别同一基因组上的不同启动子,表达不同的基因。例如枯草杆菌导致RNA链的延伸缓慢第12页/共129页II.转录的酶学4.真核生物RNA聚合酶 真核生物有四种RNA聚合酶,分别为RNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和线粒体RNA聚合酶,分子量大致都在500kD,它们专一性地转录不同的基因,转录产物也不同RNA聚合酶Ⅰ:位于核仁中,负责rRNA转录,转录活性最强RNA聚合酶Ⅱ:位于核质中,负责核不均一RNA(hnRNA)的合成,而hnRNA是mRNA的前体RNA聚合酶Ⅲ:合成tRNA和许多小核内RNA第13页/共129页III.转录过程转录起始位点识别* 转录起始与延伸转录终止 III.转录过程第14页/共129页1. 转录起始位点识别 转录是从启动子(DNA分子的特定部位)开始的,同时也是RNA聚合酶全酶结合部位 转录起始位点的识别:RNA聚合酶与启动子DNA双链相互作用并与之相结合的过程 为什么RNA聚合酶仅能在启动子处结合呢?显然启动子处的核苷酸序列具有特殊性 第15页/共129页III.转录过程 -10 +1+10下游(Downstream)上游(Upstream)转录起始位点(Starting Point)定义:能被RNA聚合酶识别、结合并启动基
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