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密度梯度离心过程 1 5 2 3 4 应用生物化学2全文共44页，当前为第31页。 1）速率区带法（rate zonal） 根据样品中不同粒子所具有的不同的尺寸大小及沉降速率（S）分离。 将所需分离的样品小心地加至密度梯度溶液的顶部。样品在梯度溶液表面形成一负梯度。由于不同大小的粒子在离心力作用下，在梯度中移动的速度不一样，所以经过离心后会形成几条分开的样品区带。 注意：样品粒子的密度（ ρp）必须大于梯度液注中任一点的密度（ρm ）。离心过程必须在区带到达管子底部前停止。 50000rpm×15min 50000rpm×20min STOP 应用生物化学2全文共44页，当前为第32页。 2）等密度离心法（isopycnic） 根据粒子的不同密度来分离。离心过程中，粒子会移至与它本身密度相同的地方形成区带。 密度梯度的选择要使梯度的范围包括所有待分离粒子的密度。样品可以在密度梯度液粒上面或均匀分布在密度梯度中。经离心后，样品粒子达到它们的平衡点。 注意：平衡后粒子的分离完全由其密度决定，与时间无关。 应用生物化学2全文共44页，当前为第33页。 1 2 3 粒子密度（ ρp） 最大介质密度（ρm ） 等密度离心法 应用生物化学2全文共44页，当前为第34页。 不连续梯度 等密度离心法的离心结果 连续梯度 密度屏障 I II 应用生物化学2全文共44