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《生物化学》实验指导 实验室规则 一、实验目的 生物化学是医学教育中的一门实践性较强的基础学科。 实验教学是过程的重 要组成部分，是理论教学的延长和补充。实验目的是： 1、 初步学会生物化学实验的基本操作技术及实验研究的基本方 法。 2、 熟悉生物化学实验原理，认识一些临床生化查验项目。 3、 培养严肃认真的工作方法、实事求是的科学态度、团结协作 的工作作风和察看剖析、思考、独立解决问题的能力。 二、实验基本要求 实验教学包括实验前准备、 实验操作、整理实验结果、书写实验报告等环节， 为了提高实验效果，实现实验目的，要求学生必须做到以下几点。 （一）实验前 1、 认真阅读实验指导，认识实验目的和要求，充分理解实验原 理，熟悉实验步骤、操作程序和注意事项。 2、 预测实验各个步骤可能获得的结果，对预期实验结果能做出 合理的解释。 3、 注意和估计实验中可能发生的误差， 并拟订防备误差的举措。 （二）实验时 1、 保持实验室肃静，不能进行与实验无关的活动。 2、 在教师或实验技术人员的指导下，熟悉仪器的结构、性能及 操作规程。 3、 实验器材摆放齐整，有条不紊、装置正确。 4、 按照实验步骤，严肃认真的顺序操作，不能任意更动。 5、 爱惜公物，注意节俭实验器材和药品。 注意安全， 严防触电、 火灾、酸碱灼伤及中毒事故的发生。 6、 认真、耐心地察看实验田中出现的现象，随时客观的记录实 验结果，免得发生错误或遗漏。实验条件应始终保持一致，如有改动 ,应 加文字说明。 （三）实验后 1、 整理实验结果，书写实验报告，准时交给指导教师评阅。 2、 整理实验仪器和冲洗玻璃仪器，封闭仪器、设施和电源。清 点实验器材，办理借还手续。 3、 做好实验室清洁卫生工作，封闭水、气阀门，切断电源，关 闭门窗，保证安全。 实验一 生化实验基本操作 一、实验目的 经过基本操作训练， 学会娴熟进前进行玻璃仪器洗涤；吸量管使用；溶液的混淆； 离心计使用；７２１型分光光度仪使用。 二、实验用品 烧杯、试管；吸量管、移液管；旋涡混淆（振荡）器、玻璃棒；离心计使用；７２１型分光光度仪 三、实验内容及步骤 （一）玻璃仪器的洗涤 在生化实验中， 玻璃仪器干净与否， 是获得正确结果的重要环节。 干净的玻璃仪器内壁 应十分光亮光洁，无水珠附着在玻壁上。 （二）吸量管的使用 1． 刻度吸量管的正确使用方法 用右手拇指和中指夹住管身， 将吸量管的尖端伸入试液深处， 左手持洗耳球把试液吸入管内至高过刻度以上时， 快速用右手食指按住吸量管的上口， 以控制试液的泄放。 吸液后应尽量使吸量管保持垂直， 使右眼与刻度等高， 稍微轻抬食指或轻轻转动吸量管， 使试液面迟缓降落， 至管内试液弯月面的最低点与吸量管的刻度线相齐为止。 然后将吸量管插到需加试剂的容器中，让尖端与容器内壁靠紧，松开食指让液体流出。液体流完后再等 15 秒钟，捻动一下吸量管后移去（如需吹的吸量管，则吹出尖端的液体后再捻转一下吸量管移去） 。 2． 定量吸液器的使用方法 (微量加样器 )： 选择适合的吸液器： 吸液前先把吸嘴套在吸引管上， 套上后要轻轻旋紧一下， 以保证联合严实。 持法：右手四指 （除大拇指外） 并拢握住吸液器外壳（使外壳突起部分搭在食指近端），大拇指轻轻放在吸液器的按钮上。 取样 (吸液 )：用大拇指按下按钮到第一停止点，以排出一定容量的空气，随后把吸嘴尖浸入取样液内，徐徐松开大拇指，让按钮慢慢自行还原，取样即告达成。 4) 排液：将吸液器的吸嘴尖置于加样容器壁上， 用大拇指慢慢地将按钮按下到第一停 止点，停留 1 秒钟（粘性较高的溶液停留时间应适合延长） 。然后再把按钮按到第二停止点 上，让吸嘴沿管壁向上滑动。当吸嘴尖与容器壁或溶液走开时，方可释放按钮，使其恢复到 初始地点。 吸液器用后应实时取下吸嘴。将吸嘴用自来水冲刷后浸入盛水的容器内（以防干涸），待实验结束后集中认真冲洗。 （三）溶液混匀 1．混匀的方法 使盛器作离心运动。 左手持试管上端，用右手指轻击试管下半部，使管内溶液作旋转运动。 利用旋涡混淆（振荡）器混匀。 不得已时可用干燥清洁的玻璃棒搅匀。 （四）离心计使用 1． TGL-20M 台式离心计使用方法操作程序： 1）把离心计放置于平面桌或平面台上，四只橡胶机脚应坚实接触平面，目测使之平衡， 用手轻摇一下离心计，检查离心计是否放置平稳。 2）翻开门盖，将离心管放入转子体内，离心管必须成偶数对称放入（离心管试液应称 量加入），注意把转子体上螺钉旋紧， 并从头检查试管是否对称放入、 螺钉是否旋紧。 3）关上门盖，注意一定要使门盖锁紧，完成用手检查门盖是否关紧。 4）插上电源插座，按下电源开关。 5）设置转子号、转速、温度、时间： （五）分光光度仪使用 721 型 1）721 分光光度计