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- 2022-10-19 发布于山东
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第八节 原生质体育种 原生质体育种技术主要有原生质体融合、原生质体转化技术,此外尚有原生质体诱变育种等。 原生质休融合育种是基因重组的一种重要方法。 原生质体融合作为一种新的基因重组手段是1978年第三届国际工业微生物遗传学讨论会上提出来的。 一、原生质体融合育种的特点 (一)杂交频率较高:细胞壁去除后在高渗条件下形成类似于球形的原生质体。 (二)受接合型或致育型的限制较小:二亲株中任何一株都可能起受体或供体的作用,因此有利于不同种属间微生物的杂交。 (三)遗传物质传递更为完整:原生质体融合是二亲株的细胞质和细胞核进行类似的合二为一的过程。 (四)存在着两株以上亲株同时参与融合形成融合子的可能性。 (五有可能采用产量性状较高的菌株作融合亲株。 (六)提高菌株产量的潜力较大。 (七)有助于建立工业微生物转化体系。 二、原生质体融合育种步骤 1.标记菌株的筛选和稳定性验证。 2.原生质体制备。 3.等量原生质体加聚乙二醇促进融合。 4.涂布于再生培养基,再生出菌落。 5.选择性培养基上划线生长,分离验证,挑取融合子进一步试验、保藏。 6.生产性能筛选。 三、原生质体融合育种的要点 (一)标记菌种的选择 获得标记菌种的方法是采用常规诱变育种,筛选出营养缺陷型或/和抗药性菌株。这里最重要的是标记必须稳定。 采用抗药性菌株除可作标记外,在实验室中还可排
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