南方医大癌生物学讲义06-1酪氨酸磷酸化的调控作用.docxVIP

第六章（1）酪氨酸磷酸化的调控作用 前言：在上一章的学习中，我们提到了 Src 和 EGFR 的酪氨酸激酶功能，但是对于酪氨酸磷酸化的具体调控功能没有展开深入的讲解。今天，我们主要的学习内容就是：酪氨酸磷酸化调控胞内蛋白质信号的定位和功能。哈哈，要讲到各种信号分子间的相互调控啦，一听就不是好惹的“家伙”呢。 先打个预防针，这一章节的内容可能是整本书最有挑战性的一章了。因此，各种字眼，每个句子的意思，大家可要花费一番不小的心思去琢磨呢。虽然比较难啃，但是估计也是各位同学最想啃下来的部分了，要加油哦~ 从细胞表面至细胞核的信号通路 01 暴露于有丝分裂原的细胞，其生长和分裂的改变包含着成千上万种胞内蛋白的协同作用。那么，生长因子是结合并激活它们的受体后发生了什么改变呢？ 对于这些问题的认识的重要进展来自于 1981 年的实验，即利用撤除生长因子的血清培养正常细胞（使用正常成纤维细胞）的实验。在 “血清饥饿 ”期间，培养的细胞都可逆地进入了不生长的静止状态，称为 G0期。处于 G0 期几天后，“血清饥饿”的细胞又被置于含有新鲜血清中获得充足的有丝分裂生长因子。此实验的目的是将所有的培养细胞都诱导至一个活跃生长和分裂同步的状态。的确，经过 9~12h 后，这些原先静止的细胞大多数开始了 DNA 的复制，几小时后又开始了细胞分裂。 在不到 1h 的时间内，100 多种胞内基因即被诱导转录 。这些基因表达被我们称为即刻早期基因?(IEG) 的表达，在生长因子剌激不到半小时内就迅速增加。 1981 年实验的另一个衍生实验，是用新鲜血清和放线菌酮一起处理细胞。放线菌酮是一种能阻断所有胞内蛋白质合成的物质。尽管抑制了蛋白质合成，即刻早期基因的诱导依然正常进行。这表明在血清加入细胞的时候，激活即刻早期基因的转录所需要的蛋白质就已经就位了。换句话说，这些基因的诱导不需要蛋白质的从头合成。 在即刻早期基因 mRNA 诱导 1h 内，第二轮基因诱导表达开始了。这些延迟早期基因的诱导表达会被放线菌酮有效阻断，表明它们的表达依赖于蛋白质的从头合成（实际上，这些延迟早期基因的表达似乎依赖于即刻早期基因表达出来的转录因子）。 图1:即刻早期基因与延迟早期基因 即刻早期基因编码一些有趣的蛋白质。其中一些是转录因子，它们一旦被合成，就能诱导下一轮基因的表达，包含 myc、fas 和 jun 等最初鉴定的与逆转录病毒转化相关的基因。其他即刻早期基因则编码分泌型细胞因子 (cytokine), 或者编码细胞骨架蛋白。 给静止细胞添加生长因子除了能迅速诱导核内基因表达外，还能引起细胞生理上的其他变化。静止细胞暴露于血清后，通过活化一些具有促核糖体起始 mRNA 功能翻译的蛋白质，使胞内蛋白质的合成速率显著增加。一些生长因子可以诱导细胞运动，表现为沿培养皿的底层移动。其他一些生长因子可以引起决定细胞形态的平滑肌肌动蛋白纤维的重组，来协助构建细胞骨架——这是决定细胞形态的支架。还有许多生长因子为细胞存活提供信号，保护细胞不会激活一些不利于细胞生存的反应，如细胞亡之类的自杀程序。 这些形形色色的反应表明配体激活生长因子受体后，可发散出一系列不同的生化信号，并且这些信号作用于胞内的不同靶点，代表着这背后肯定有着纷繁复杂的信号转导机制。 信号转导的故事从Ras蛋白说起 02 细胞的信号转导通路慢慢地像一个游戏拼图那样被拼凑起来，其中的故事要从 Ras 蛋白开始。在上一章中我们讨论过 Ras 的特点，但并没有表明它是如何与整个信号网络联系起来的。 故事起源于研究者发现一个被称为 Sevenless 的基因对组成果蝇复眼的光感原件小眼的正常发育起关键作用。Sevenless 基因编码的蛋白质含有酪氨酸激酶受体普遍存在的结构，即哺乳动物的成纤维细胞生长因子受体。一个名为 Son of sevenless 简称 sos 的基因编码其中一个下游蛋白，并发现 Sos 蛋白与参与激活核苷酸交换的 G 蛋白如 Ras 有关。这些酵母蛋白，通常被称为鸟嘌呤核苷酸交换因子 (GEF), 可通过诱导 G 蛋白释放 GDP, 以便为 GTP 的结合提供位点。这样便可将这些 G 蛋白从无活性状态诱导为活化的、可释放信号的构象。而这个精细的反应是 Sos 作用于 Ras 之后的结果。因此 ，Sos 就是长期以来寻找的可将 Ras 转化为活性状态的上游刺激因子，是调控 Ras 的关键组分。 图2：Sos 蛋白 随后陆续发现了信号级联中的其他中间分子。其中的两个是 Shc 和 Grb2。这些蛋白质的功能是作为接头蛋白，在生长因子受体和 Sos 之间起桥连作用。第三个此类的接头蛋白称为 Crk, 是一种 由 CT10 鸟肉瘤病毒编码的癌蛋白。 以上这些结果提示人们有这样一条线性信号级联：酪氨酸激酶受体→Shc→G