南方医大癌生物学讲义08-3 Myc、TGF-β在细胞周期时钟中的作用.docxVIP

第八章（3）Myc、TGF-β在细胞周期时钟中的作用 前言：在前一节的学习中，我们已经了解了Rb基因在细胞周期中的作用。人类癌细胞会通过多种策略来逃避细胞周期的调控，今天我们就要来学习Myc蛋白和TGF-β在细胞周期中的调控作用。 No.1 Myc蛋白调控细胞增殖或分化的方向 Myc 蛋白在调节异常的情况下会成为一种癌蛋白。超过 70% 的人类肿瘤中过度表达Myc (通常称为c-Myc), 或者与其相近的两个同源蛋白N-Myc和L-Myc。Myc癌蛋白家族的功能与我们前面提到的癌蛋白非常不同。其他癌蛋白特别是Ras和Src, 在细胞膜附近作用并引发复杂的级联信号，激活胞内信号转导蛋白，最终激活核转录因子。相比之下，Myc和它的同源蛋白存在于核内，并发挥促生长转录因子的功能。 这 3 个Myc家族蛋白属于一个庞大（多于100个成员）的bHLH转录因子家族。它们以共同的三维结构命名。这个三维结构包括一个碱性的 DNA 结合结构域，以及与之相连的一个由氨基酸序列构成的 a 螺旋-环状结构-a 螺旋结构。该转录因子家族成员能与自身或者其他成员形成同源或者异源二聚体。这类二聚体复合物随后与被称为E-box(由CACGTG序列组成）的特异性调控序列所结合，E-box 序列存在于其调控的目的基因的启动子区域。 Myc作为转录因子是起促进作用还是抑制作用，不仅仅只由它自身水平决定，还由与它结合的bHLH蛋白水平决定。后者能够增强或者抑制Myc作为转录激活因子的功能。Myc蛋白的磷酸化能调节它的功能及稳定性，当Myc与能促进转录激活的 bHLH 配体Max结合后，Myc-Max异源二聚体转录因子将有效地促进一群目的基因表达，其中许多基因的产物对细胞周期具有潜在的促进细胞增殖效应。 虽然Myc受有丝分信号的强烈影响，但Max的水平在胞内保持相对稳定。因此，当细胞在血清促有丝分裂剂中培养时，Myc会大量累积；相反的，当移除血清中促有丝分裂剂时，Myc的水平将急剧下降。这意味着 Myc-Max异源二聚体的水平在正常细胞中是由有丝分裂信号所调控的。 Myc作为转录因子的功能比较特殊。其他的转录因子可能仅参与转录起始。但是，对于许多基因来说，RNA聚合酶 II 开始转录后，会在一个位于转录起始位点下方约 50bp处的位点暂停。此时，Myc-Max异源二聚体结合到DNA上，与RNA聚合酶 II 复合物发生作用，使其通过暂停位点，并继续转录整个基因，即延伸RNA转录物。如果没有Myc-Max的作用，RNA 聚合酶 II 将停止在该暂停位点。在一项研究中发现 70%活跃转录的基因在这些暂停位点中都有Myc-Max异源二聚体结合。 当活跃生长的细胞还没有进入有丝分裂后期的分化状态时，Myc 可以促进细胞增殖并阻断细胞分化。当细胞增殖减缓并开始分化时，因为Mxd蛋白水平升高，替代了复合物中的Myc, Myc-Max复合物解离。后来形成的Mxd-Max复合物不再刺激转录，使许多人体组织细胞进入有丝分裂后期的分化状态。 图1：Myc蛋白调控细胞增殖或分化的方向 No.2 Myc在细胞周期时钟中的作用 Myc 驱动的多种基因表达改变可以通过一种或者其他多种方式推动细胞通过G1期： ① Myc的众多靶基因之一是cyclinD2 基因。cyclinD2的高表达会引起pRb的低磷酸化。 ② Myc还能促进CDK4的基因表达，CDK4表达上调后形成cyclinD-CDK4复合物使pRb低磷酸化，与此同时还能偏离CDK抑制因子p27Kip1进而从抑制作用中释放cyclinE-CDK2 复合物。 ③ Myc也能促进Cul1蛋白的表达，Cul1蛋白在泛素化降解CDK抑制因子p27Kip1的过程中起到核心作用。 ④ Myc可以通过与另一个转录因子Miz-1的作用，行使转录抑制因子的功能。Myc 能抑制那些编码CDK 抑制因子p15INK4B和p21Waf1的基因表达，从而抑制 CDK4/6和CDK2的功能。 我们即将在后面提到，TGF-β会利用这两种CDK抑制因子来阻止细胞通过G1期。因此，Myc 通过抑制这两个CDK抑制因子的表达，对TGF-β的生长抑制功能发挥拮抗作用。这表明即使肿瘤细胞处于存在正常细胞增殖抑制因素的情况下（例如，周围环境存在 TGF-β），还能通过这种重要的方式继续增殖。 ⑤ Myc能够诱导编码 E2F1、E2F2和E2F3转录因子蛋白的基因表达。通过使这些促生长转录因子在胞内积累，Myc 再次打破平衡，促进细胞增殖。 图2：Myc 在细胞周期时钟中的作用 对果蝇细胞中Myc的功能研究得知，Myc还对许多细胞周期机制以外的其他目标基因起作用。检测这些基因后发现Myc在胞内的广泛效应是促进细胞生长，从视觉上而言就是增加细胞的体积。事实上，Myc 调节的促生长基因数量