南方医大癌生物学讲义03-1病毒可以引发肿瘤.docxVIP

第三章（1）病毒可以引发肿瘤 “病毒可以在被其感染的宿主细胞内增殖、杀死宿主细胞、释放能够感染附近其他宿主细胞的子代病毒颗粒，且在组织中快速传播，故在所到之处造成广泛的破坏。然而，有些病毒并不杀死被感染的细胞，而是促使其宿主细胞不受限制地增殖，这类病毒被称为肿瘤病毒。肿瘤病毒通常含有相对简单的基因组，但它们却能控制被其感染的细胞及其复杂的基因组，表明它们具有非常高效的基因来干扰被感染宿主细胞本身复杂的调控网络。” 图3-1-1：双链DNA（dsDNA）基因组病毒的生命周期 Peyton Rous发现鸡肉瘤病毒 1908年，两位哥本哈根的研究者从鸡白血病细胞中提取得到一种病毒，将其注入其他鸟的体内后，这些鸟随后也感染了该疾病。遗憾的是，他们并没有将最初的发现研究到底。 1909年，Peyton Rous开始对雌鸡胸肌中出现的肉瘤进行研究。起初，Rous将这种肉瘤的碎块植入同一品种的其他鸡体内,成功地接种肿瘤。随后，他将一块肉瘤研磨得到的匀浆液进行过滤，把滤过液注入幼鸡体内后，它们也都产生了肿瘤。接着，他发现这些诱导产生的肿瘤经过匀浆后，也能够感染其他鸡并在注射部位产生肉瘤。 图3-1-2：Rous在鸡中诱导肉瘤。这个循环能无限次地重复，且子代病毒诱发肉瘤的速度较原代病毒更加迅速 ? ? 从鸡肉瘤中分离得到的病毒被称为 Rous 肉瘤病毒（RSV），它们能够在鸡的组织内进行增殖，且在被感染而产生的肿瘤组织中被发现比最初注射的量多得多。Rous肉瘤病毒的研究结果使某些人确信：几乎所有人类疾病都由传染性病原体引发，肿瘤如同霍乱、结核、狂犬病和败血症一样，其病因与某种特定微生物病原体相关联。此后不久，1913 年Dane Johanne Grib Fibiger报道称，大鼠胃癌的发生能够溯源到其含有的螺旋体蠕虫。（注：后来证明，Fibiger所描述的胃肿瘤其实是由于这些大鼠严重缺乏维生素而化生的胃上皮细胞）他因此获得了1926年诺贝尔生理学或医学奖，直接有力地肯定了最初由Rous研究结果提出的观点：肿瘤是一种传染性疾病。 ? ? ???今天我们知道，“肿瘤是一种传染性疾病”的认识是片面的。但肿瘤病毒的发现，在当时对人类认识肿瘤的发病机制，的的确确产生了革命性的影响。 ? 肿瘤病毒能感染并转化体外培养细胞 ???? 在Peyton之后，Harry Rubin发现：将含RSV的悬液加入培养有鸡胚胎成纤维细胞的Petri培养皿时，被RSV感染的细胞似乎也能无限期地存活下来。重要的是，被RSV感染的细胞表现出很多与肿瘤细胞相似的性状：它们聚集形成焦点簇，在显微镜下呈现出肿瘤细胞特有的圆形形态，它们的新陈代谢与从肿瘤中分离的细胞相似。 图3-1-3：RSV诱导形成的细胞簇（圆形、具有折光性）与正常细胞（扁平）对比鲜明 为了研究最初被RSV感染的细胞是如何增殖的，Rubin和Temin在Petri培养皿底生长的细胞层上铺了一层琼脂胶，以防止游离的病毒颗粒从最初感染的细胞传播到培养皿中其他未感染的细胞，这保证了鸡胚胎成纤维细胞的任何行为改变都是由病毒的初始感染导致的。结果显示，RSV感染诱导产生的转化细胞与正常细胞不同，它们很明显丧失了接触抑制效应并不断增殖，细胞彼此堆积形成肉眼可见的多层细胞簇。 图3-1-4：被转化的细胞形成细胞簇丧失接触抑制 在该实验条件下，同一个细胞簇中的所有细胞都是被一个RSV颗粒感染和转化的一个原代细胞的后代。而在自发产生的人类肿瘤中，所有细胞都是由一个克隆的产物所复制产生。 基于此，Rubin等人推测：RSV在Petri培养皿中诱发的细胞转化与活体动物中肿瘤的产生过程具有相似性。细胞转化（从正常细胞到肿瘤细胞的转换）这一过程不仅仅只在复杂的、难以研究的活组织环境中发生，也能在Petri培养皿中完成。 这些研究结果彻底改变了肿瘤的研究进程：肿瘤形成可以在单个细胞水平上进行研究，肿瘤整体的复杂生物学行为可以通过研究形成肿瘤的转化细胞来了解。 维持转化需要病毒持续存在 RSV诱导产生的细胞簇中的细胞行为显示，转化表型从最初感染转化的鸡细胞传递给了它的直系后代。这种传递引起了另一个问题：RSV病毒颗粒感染和转化了细胞簇的祖细胞后，是继续影响所有直系后代细胞的行为以保证细胞处于维持被转化的状态，还是以“打了就跑”的方式离开”犯罪现场”？ 1970年，加利福尼亚大学伯克利分校建立了一种RSV突变株：当在37℃培养时能够转化鸡细胞，而在41℃培养时则不能（后者是培养鸡细胞的正常温度）。在鸡胚胎成纤维细胞被RSV温度敏感型突变体感染后，在允许温度（37°C)下进行培养时，病毒的转化功能得到表达，细胞将发生转化。但是将含有这些被感染细胞的培养物转移至非允许温度(41°C)时，细胞恢复到正常的、未转化的形态。之后，将这些培养物再转移至允许温