南方医大癌生物学讲义04-1并非所有肿瘤都由病毒感染引起.docxVIP

第四章（1）并非所有肿瘤都由病毒感染引起 在上一章的分享中，我们主要学习了病毒感染和肿瘤发生之间的关系。的确，随着20 世纪 70 年代 DNA 和 RNA 肿瘤病毒的发现，为肿瘤生物学家解释人类肿瘤的起源提出了一个简单而有力的理论。 但是，我们有这样一个疑问：所有的肿瘤的发生都是由于肿瘤病毒感染吗？ 并非所有肿瘤都由病毒引起 随着研究的不断深入，人们发现用这个理论难以将人类肿瘤的生物学和流行病学特征统一起来。显然，大多数的人类肿瘤并不像传染病那样从一个个体传播到另一个个体。人们也很难找到具有典型小范围流行病学特征的肿瘤病例。最重要的是，自20 世纪 70 年代以来，研究人员尝试从多种人类肿瘤中分离出病毒，但均以失败告终。在西方国常见的肿瘤中，只有宫颈癌和肝癌能够明确地与特定的病毒病原体联系起来。 20 世纪初期，日本科学家 Katsusaburo Yamagiwa 的研究表明，化学物质能够诱导实验动物发生肿瘤（见第2章）。该研究表明，在兔耳朵上连续数月反复涂抹煤焦油能够引发皮肤癌。20 年代中期 ，法国巴黎的一篇博士论文记载了百余例肿瘤病例，其中大多数为皮肤癌，这些患者都有在 X 射线环境中工作的经历。显然，这两项研究中肿瘤的直接诱因都是非生物性的，或者为化学有机物或者为射线。 在这种情况下，一些支持病毒致癌说的学者，尤其是从事逆转录病毒研究的学者，在 20 世纪 70 年代早期提出了一种新的机制学说，解释了在没有明显外部病毒感染的情况下，肿瘤病毒是如何参与多种肿瘤发生的。 这种新机制的提出源自于逆转录病毒独特的生物学特性。在某些情况下，逆转录病毒的基因组能够整合到各种脊椎动物的生殖细胞基因组中，由此产生的前病毒可以像孟德尔等位基因一样遗传至后代。这些 内源性前病毒常常处于转录沉默的状态，而且它们在生物体细胞中的存在也不明显。只有在极少数的情况下，这些通常保留了编码感染性逆转录病毒颗粒能力 的内源性前病毒的表达会被唤醒。 从某些品系的小鼠中分离出成纤维细胞，并向其中加入胸腺嘧啶类似物——溴脱氧尿苷（BrdU), 能够激活这些细胞中内源性的逆转录病毒 (ERV) 基因组。作为应答， 这些由于内源性前病毒转录沉默而表面上看没有被感染的结缔组织细胞，开始释放逆转录病毒颗粒。一旦这些细胞释放具有感染性的病毒颗粒，它们就能通过细胞间的感染不断增殖，并迅速扩散到全身，诱发白血病。 这个理论在小鼠身上似乎是成立的，那么在人身上呢？事实上，大多数存在于人类基因组中的内源性逆转录病毒基因组，都是 500 万年前早期的灵长类动物的生殖细胞受到感染后遗传而来的。从那时起，这些前病毒的序列渐渐发生突变，失去产生特定的具有传染性的逆转录病毒颗粒的能力，成为大量存在于人 类基因组中的垃圾 DNA 序列的一部分。尽管多达 8%的人类基因组源自内源性逆转录病毒的基因组，但在这些接近 4 万个逆转录病毒起源的基因片段中，只有少数几个被证实具有完整性及编码特定感染性病毒的能力。例如，其中之一的 HERV-K 亚家族， 该家族整合至人类生殖细胞的时间相对较晚，前病毒相对比较完整。即便如此，人们也没能发现它们具备产生感染性病毒颗粒或者诱发肿瘤的能力。人们始终不能从人类肿瘤中分离出有感染性的逆转录病毒颗粒，这个假说因为缺乏支持性的证据而很快垮台。 DNA转染检测非病毒性癌基因 内源性逆转录病毒理论虽然终结了，但是它也给非病毒性致癌作用研究的人提供了另一种可能的理论：致癌物质作为诱变剂发挥作用。无论是物理因素（如 X 射线）还是化学因素（如烟焦油），这些物质都能使易感细胞基因组中关键的生长控制基因发生突变，从而诱发肿瘤。这些生长控制基因可能是正常的细胞基因，如由逆转录病毒学家发现的原癌基因。一旦这些基因发生突变，产生的突变等位基因可能发挥活化的癌基因的作用，促使含有这些突变体的细胞发生癌变。 为了明确非病毒性癌基因是否在化学诱变的细胞中存在，一种新的实验方法应运而生。该方法将癌细胞的 DNA（或部分基因）导入正常细胞中，并观察受体细胞是否对导入的肿瘤细胞 DNA 产生反应 ，通过受体细胞在导入肿瘤细胞 DNA 数周后在培养基中形成的集落数来评价受体细胞是否发生了转化。 1972 年 ，一种高效的基因导入方法产生了，很快被命名为 “转染 ”，它是利用 DNA 和磷酸钙晶体形成共沉淀，在此基础上将裸 DNA 分子直接转入哺乳动物的细胞内。 在 1978~1979 年的实验当中，研究人员用 3- 甲基胆蒽（3-MC）处理不同的小鼠细胞系，诱导其发生癌变，然后提取 DNA 加入源自于小鼠胚胎成纤维细胞的 NIH 3T3 细胞系培养基中。几周之后，NIH 3T3 细胞形成 大量的转化灶。转化灶中的细胞随后被证实具有锚定非依赖生长及致瘤能力。这个实验证明了供体肿瘤 DNA 中含有