南方医大癌生物学讲义05-2生长因子与受体（中）.docxVIP

第五章（2）生长因子与受体（中） 5、生长因子基因可转变为癌基因 1983年，人们发现血小板衍生生长因子（PDGF）的β链序列与猴肉瘤病毒v-sis癌基因编码的癌蛋白高度相关，后来的氨基酸序列鉴定提示了另一个癌蛋白转化细胞的重要机制：猴肉瘤病毒感染细胞后，它的sis癌基因促使被感染细胞释放大量PDGF样Sis蛋白，后者与释放它们的自身细胞上的PDGF-R结合，造成这些细胞上PDGF受体强烈活化，产生持续的生长刺激信号。 PDGF主要刺激间充质细胞（如成纤维细胞、脂肪细胞及平滑肌细胞）生长，而EGF则主要刺激上皮细胞生长。这也解释了为什么猴肉瘤病毒只能转化成纤维细胞，却无法转化上皮细胞。 我们已知许多肿瘤细胞可以产生并释放大量它们自身亦可应答的生长因子。肺癌可产生至少3种不同的生长因子：肿瘤生长因子-α（TGF-α）、干细胞因子（SCF）及胰岛素样生长因子-1（IGF-1），并可表达这3种配体的受体，从而同时确立了3条自分泌信号环路。这些信号环路对肿瘤生长具有重要作用，例如，在一项对小细胞肺癌（SCLC）患者的研究中，癌细胞表达Kit（即受体SCF）的患者确诊后的平均存活时间仅为71天，而癌细胞不表达Kit的患者则可平均生存288天。 表5-2-1：产生自分泌生长因子的人类肿瘤举例 一般来说，自分泌信号环路意味着组织和器官存在潜在危险。在正常组织中，个体细胞的增生几乎都依赖于从其他细胞获取的信号；这种相互依赖性确保了细胞种群及组织结构的稳定性。一个获得控制自身增生能力的细胞，其自我强化的正反馈环路往往会导致生理失衡，因此会造成巨大的危险。 6、受体酪氨酸激酶依赖转磷酸化发挥作用 生长因子受体与配体结合后，其激酶结构域被激活，磷酸化某些胞内蛋白质的酪氨酸残基，从而使细胞增殖。这又引发了一个问题：生长因子受体与配体结合后，是怎样利用它们的酪氨酸激酶结构域来发出信号的呢？ 图5-2-1：在缺乏EGF时，32P04标记的富含磷酸化氨基酸的蛋白质；当添加EGF到人表皮样癌细胞A431时，右下方的点变强，根据内参标记表明这是磷酸化酪氨酸。 在没有配体的情况下，一个生长因子受体通常以单体（一个亚基）形式嵌入质膜。当其生长因子配体（配体为同源二聚体）存在时，受体分子就会结合在配体两个亚基中的一个上。其后，配体-受体复合物将在质膜上徘徊直到有第二次机会遇到另一个受体分子，配体中没有结合受体的那个亚基将和第二个受体分子结合。这样，通过二聚体形式的配体为桥梁，两个受体分子成功地交联在一起。两个受体分子的胞外结构域通过与配体结合而发生二聚化，胞质部分通常也会被拉在一起。每个激酶结构域磷酸化另一受体胞质结构域里的酪氨酸残基，这种双向的相互磷酸化作用被称为转磷酸作用。 图5-2-2：受体二聚化、配体结合与转磷酸作用：在没有配体结合时，生长因子受体分子（左，绿色）在质膜平面自由横向迁移；当两个受体分子相遇时，它们形成同源二聚体且待续时间短暂，受体的胞外结构域发生构象改变并获得与生长因子配体结合的强亲和力（步骤1）；随后EGF配体分子的结合可导致受体二聚体的稳定性增强并激活酪氨酸激酶（TK）结构域（步骤2）；每个受体亚基磷酸化另一个亚基的C端胞质尾区转磷酸化作用（箭头） 这些酪氨酸残基的磷酸化至少导致两种后果。 首先，激酶催化裂隙（即蛋白酶发挥功能的区域）通常受蛋白质的环结构阻隔，从而阻止激酶与其底物有效结合。阻隔“活化环”的关键酪氨酸的转磷酸作用可导致该环结构移开，从而可使底物分子进入催化裂隙。其次，转磷酸作用可导致生长因子受体胞质部分激酶区域?以外的一系列酪氨酸残基磷酸化。 受体的二聚化模型解释了生长因子受体分子的过表达如何参与肿瘤的形成：生长因子受体在细胞表面的表达水平远远超过了正常细胞，由于受体分子可以自由地在质膜平面横向迁移，它们的高数量使得分子之间经常发生碰撞，这种碰撞类似配体结合所引发的受体二聚化并导致转磷酸作用、受体激活和信号传递。 此外，除了二聚化，配体结合的胞外结构域还经历某种类型的旋转或立体转换，这种转换通过质膜传递至胞质激酶结构域，使其本身转变成更利于转磷酸作用的新构象。事实上，在一些酪氨酸激酶受体中，即使没有配体结合，组成性的二聚化也是可能存在的，配体只是使受体分子的胞外和胞质结构域同步旋转，从而有利于其激酶结构域转导信号。 图5-3-3：在一些恶性肿瘤中，当编码生长因子受体（黑色）的基因碰巧与通常能形成二聚体或高阶寡聚物（红色）的基因融合时，其产物可将一对受体单体拖到一起（这里列出的是人类肿瘤中存在的一些突变融合受体）。 7、其他类型的受体介导哺乳动物细胞与环境的交流 细胞从周围环境中接收各种各样的生化信号，这提示许多类型的受体可能参与了肿瘤的发病机制。上述酪氨酸激酶受体（RTK）只是众多结构多样的受体类型之一，其他类似RTK的受体