仪器分析色谱法的基本原理.pptVIP

第一页，共四十页，2022年，8月28日 本章基本要求 ⒈ 理解混合物中各组分在色谱柱内分离的原因； ⒉ 了解色谱流出曲线和术语； ⒊ 理解柱效率的物理意义及计算方法； ⒋ 理解速率理论方程对实际分离的指导意义； ⒌ 掌握分离度的计算方法及影响分离度的色谱参数。 第二页，共四十页，2022年，8月28日 2.1 概 述 2.1.1 色谱法发展史 色谱法是俄国植物学家Tswett（茨维特）于1903年首先提出的。他把植物色素的石油醚抽提液倒入一根装有固体碳酸钙颗粒（固定相）的竖直玻璃管（色谱柱）中，并再从管的上部加入纯的石油醚（流动相），任其自由流下。这时植物色素的抽提液沿玻璃管流动，在管内形成具有不同颜色的色带，每个色带代表不同的组分。 -------- “色谱”（色层）因而得名 第三页，共四十页，2022年，8月28日 胡萝卜素（橙色） 植物色素 叶绿素（绿色） 叶黄素（黄色） 石油醚 CaCO3固定相 1941年，Martin、Syuge发明了液－液色谱。 1952年，James、 Martin发明了气相色谱。 20世纪60年代，出现了高效液相色谱。 第四页，共四十页，2022年，8月28日 ⑴ 色谱法：借助在两相间分配系数的差异，而使混合物中各组分获得分离的技术称为色谱分离技术。 ⑵ 固定相：填充柱内的填料（固体或液体）。 ⑶ 流动相：携带样品流过固定相 (气体、液体和超临界流体)。 ⑷ 色谱柱：装有固定相的柱。 色谱分离过程：当流动相中携带混合物经过固定相时，与固定相发生作用，由于各组分的结构性质（溶解度、极性、蒸汽压和吸附能力等）不同，这种相互作用产生强弱的差异。在同一推动力的作用下，不同组分在固定相滞留时间长短不同，按先后不同的次序从固定相中流出。 几个基本术语： 第五页，共四十页，2022年，8月28日 气相色谱 -------- 用气体作流动相 液相色谱 -------- 用液体作流动相 由于固定相可分为固体吸附剂和涂在固体担体上或毛细管内壁上的液体固定相，故可将色谱法分为下述四类： 气–固色谱 气体 固体 流动相 固定相 液体 液体 1、按两相所处的状态分类 液-固 色谱 气-液 色谱 液–液色谱 2.1.2 色谱法分类 第六页，共四十页，2022年，8月28日 ①柱色谱：固定相装在柱管内。它又可分为填充柱色谱和毛细管柱色谱。固定相装在色谱柱（玻璃管或毛细管）内。 ②纸色谱：用滤纸作固定相或载体，把试样液体滴在滤纸上，用溶剂将它展开，根据其在纸上有色斑点的位置与大小，进行鉴定与定量测定。 ③薄层色谱：将固定相研磨成粉末，再涂敷成薄膜。样品的分离形式类似纸色谱。 2、按固定相形状分类 第七页，共四十页，2022年，8月28日 ①?吸附色谱 （L-S，G-S）：利用吸附剂对不同组分物理吸附性能的差异进行分离。? ②?分配色谱（L-L，G-L）：利用不同组分在两相中分配系数的不同进行分离。在液-液分配色谱中，根据流动相和固定相相对极性不同，又分为正相分配色谱和反向分配色谱。 ③?离子交换色谱（L-S）：利用组分离子与离子交换剂的交换能力不同进行分离。 ④?空间排阻色谱（凝胶色谱法，L-S）：用多孔物质对不同大小分子的阻碍作用进行分离。固定相是一种分子筛或凝胶，利用各组分的分子体积大小不同而进行分离的方法。 ⑤ 亲和色谱：利用不同组分与固定相的高专属性亲合力进行分离的技术，常用于蛋白质的分离。 3、按分离过程的物理化学原理分类 第八页，共四十页，2022年，8月28日 色谱法的分类大致如下： 根据以上所述，将色谱法的分类总结于下表中： 第九页，共四十页，2022年，8月28日 2.2 色谱分离原理