甲醇蛋白蛋氨酸肌苷酸左旋肉碱介绍生产工艺.pptVIP

4.混合发酵法 采用两种不同功能的微生物,其中之一先将糖质或其他原料转化生成富马酸，另一种微生物将富马酸转化成L-苹果酸，两种微生物可先后加入，也可同时加入。 常用菌先用少根根霉或华根霉把糖质原料转化成富马酸，然后利用膜醭毕赤酵母普通变形杆菌及宛氏拟青霉之一，把富马酸转化成 苹果酸的研究。 第三十一页，共八十四页。 混合培养发酵苹果酸进程 FU：富马酸 LMA：L-苹果酸 RG：残糖 第三十二页，共八十四页。 优势： L-苹果酸的转化率高 缺点： 培养条件要求比较严格 发酵周期较长 产酸率相对较低 副产物较多 第三十三页，共八十四页。 5.固定化酶或细胞转化法 利用具有高活性富马酸酶的微生物细胞或富马酸酶，采用固定化酶或细胞反应器，将富马酸转化成L-苹果酸 微生物：短杆菌、产氨短杆菌、黄气短杆菌、 解脂假丝酵母及温特曲霉等 载体：藻酸钙凝胶、角叉菜胶及聚丙烯酰胺凝胶等 第三十四页，共八十四页。 生产过程 一是固定化细胞的制备：将产酶菌株培养成熟后，收集菌体细胞，包埋菌体，制备固定化酶或细胞。 二是L-苹果酸制备：先将富马酸和CaCO3 反应转化成为富马酸钙，再经转化柱作用生成苹果酸钙,经提取得L-苹果酸。 第三十五页，共八十四页。 局限性 固定化酶的转化率低、半衰期短 国产富马酸质量不稳定，生产成本相对较高 L-苹果酸中残留的富马酸分离去除有困难 需要考虑细胞透性 以化工产品富马酸为原料，人们食用存有疑虑， 使得绝大多数厂子处于关停状态 第三十六页，共八十四页。 6.苹果酸的测定与分离 苹果酸定性：纸层析法；或者，在试管中加入约 5ml 待测试溶液，加入 3 滴15%三氯化钛溶液，几分钟内出现白色沉淀，表明有L-苹果酸的存在。 苹果酸定量：紫外分光光度法（α-2,7-萘二酚法）； 富马酸测定：高锰酸钾滴定法； 总酸的测定： 酸碱滴定法 。 第三十七页，共八十四页。 产品分离 钙盐沉淀法 溶剂萃取法 离子交换树脂法 两性离子交换树脂法 碱性离子交换树脂法 第三十八页，共八十四页。 钙盐沉淀法缺点 酸化时消耗大量硫酸，产生大量难以处理的CaSO4废渣和废糖水; 发酵过程中常有其它有机酸产生，也能形成钙盐沉淀，所以钙盐沉淀本身不能实现苹果酸的分离，而须借助于离子交换进行精制; 此工艺提取收率低，一般只有7 0 %左右。 第三十九页，共八十四页。 溶剂萃取法 将发酵液中的有机酸用萃取剂三烷基氧化膦 (TRPO)将其全部萃入有机相。 在反萃过程中，利用反萃分配比之间的差异，使苹果酸与杂酸相分离 。 第四十页，共八十四页。 溶剂萃取法缺点 萃取剂在食品级苹果酸生产产品中的残留毒害; 苹果酸萃取过程的乳化及污染; 连续化生产时萃取剂难以循环使用。 第四十一页，共八十四页。 离子交换树脂法 室温下将发酵液通过装填有离子交换树脂的色谱柱，使其中的苹果酸被吸附，发酵废水回发酵罐循环发酵，然后用热水洗脱吸附于树脂上的苹果酸，如此反复使用。 优势: 生产收率提高，生产成本降低，几乎可完全消除生产中的三废。 第四十二页，共八十四页。 三.国内外研究进展 目前，世界上只有美国和日本采用生物技术生产该产品。日本自二十世纪70年代开始小批量生产，发展不快，产量至今不大，但日本扶桑公司开发的苹果酸制剂已应用于海带养殖业 。 目前国内外正在积极研究及已经中试或批量生产的方法主要是转化法和一步发酵法，又以一步发酵法生产苹果酸的工艺最经济、最有发展前途。 全球整体来说，L-苹果酸还没有大规模生产，但随着市场需求日益增加，发展潜力巨大。 第四十三页，共八十四页。 L-肉碱 第四十四页，共八十四页。 一、产品介绍 1.性质 L-肉碱又称肉毒碱、左旋肉碱、维生素BT，化学名为L-β-羟基-γ-三甲铵丁酸。分L-，D-型两种光学旋光体，只有L-型有生理活性。 分子式为C7H15NO3，相对分子质量161.20，结构式如下： 第四十五页，共八十四页。 呈白色吸水性结晶，易溶于水和乙醇，稳定性较好。 2.生理功能 脂肪酸代谢中脂酰基团在线粒体内膜上的载体。 缓冲线粒体酰基CoA和CoA的比率。 捕捉酰基基团，排除有毒的多余酰基。 参与膜修复过程中膜磷脂的去酰化-重酰化，利于膜的稳定。 抗细胞凋亡等。 第四十六页，共八十四页。 在动物体内肝、肾、脑的合成路径如下： 第四十七页，共八十四页。 人体必需从膳食中获取一定量L-肉碱才能最佳健康状态，其中动物性食品中含量最丰富。蔬菜、谷类水果中基本不含或含极少量。 第四十八页，共八十四页。 3.应用 食品添加剂（奶粉、运动饮料、减肥、抗衰老） 饲料添加剂（促进素食类、食草类动物生长） 治疗用药物（助消化、降血脂、治疗血管疾病、急性氨中毒、昏迷、神经系统疾病） 第