X实验动物质量监测.pptVIP

如果在同窝兄妹或双亲中该基因标记的表型与遗传概貌图一致，应考虑被测个体发生了遗传突变。在检查时如同时发现其他基因标记的表型与遗传概貌图不符，无论是杂合型还是纯合型均应考虑发生了遗传污染，应立即淘汰换种。遗传突变如无特殊保留价值，在剔除突变的个体后，整个品系可以继续保存；如有保存价值，可将突变个体单独培育成同源突变近交系。 * * 第三十页，共六十九页。 第二节 微生物学与寄生虫学监测 如何控制微生物和寄生虫，是实验动物标准化的主要内容之一。一般而言，科研中使用的实验动物，其微生物和寄生虫的控制级别越高，其结果就越精确、越可靠。 * * 第三十一页，共六十九页。 一、监测意义 1．对实验动物进行微生物、病毒与寄生虫的监控，对保证实验研究的顺利进行和工作人员的身体健康具有十分重要的意义。 实验动物被集中饲养，极易导致疾病的爆发与流行。实验动物疾病的爆发，除造成动物死亡外，还会干扰实验的顺利进行，引起生物制品的污染，对人类健康产生危害。 * * 第三十二页，共六十九页。 2．对实验动物饲养设施的监测，为确保这些设施能否控制微生物污染提供依据。 3．对引进的实验动物进行检疫，避免病原体入侵原有的动物群。 4．如动物群发生疾病，为了确证病原，对患病动物进行病原学诊断，积累对疾病的认识，收集菌株和毒株，进一步研究病原，为诊断试剂和疫苗的制备提供菌株和毒株。 * * 第三十三页，共六十九页。 二、监测方法 （一）实验动物病毒学检测方法 1．血清学检测 适用于各级各类实验动物的经常性检测和疫情普查。常用方法有：酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫荧光试验(IFA)、免疫酶染色试验(IEA)、血凝试验(HA)、血凝抑制试验(HI)、病毒中和试验、补体结合试验、琼脂扩散试验。 * * 第三十四页，共六十九页。 2．病原学检测 适用于动物群中有疾病流行，需要检出病毒或确认病毒存在的情况。检测方法有：病毒分离与鉴定，病毒颗粒、抗原或核酸的检出，潜在病毒的激活，抗体产生试验等。例如：采用HA或HI方法检查患病动物排泄物或组织悬液中的血凝素抗原；采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)检查病毒基因组；采用核酸分子杂交技术或聚合酶链反应(PCR)检出组织或排泄物中的病毒核酸。 * * 第三十五页，共六十九页。 （二）实验动物细菌学检测方法 最常用的方法是病原菌的分离与培养或进行动物接种。部分病原菌，如：鼠伤寒沙门菌、鼠棒状杆菌、布氏杆菌、沙门菌、气管败血波氏杆菌等，可采取血清学方法，但仍需结合分离培养结果最后做出诊断。对于泰泽菌，由于不能在人工培养基上生长，因此宜采用组织压片、镜检的方法进行检查，并结合病理检查结果最后做出诊断。 * * 第三十六页，共六十九页。 （三）实验动物真菌学检测方法 目前主要采用沙氏培养基分离培养。皮肤真菌一般在25℃培养，深部真菌在37℃培养。不同的真菌具有一定的菌落特点，镜下染色检查可进行种属鉴定，有时，还需借助于生物化学反应结果和免疫学方法进行最后诊断。 * * 第三十七页，共六十九页。 （四）实验动物寄生虫学检测方法 1．体外寄生虫 肉眼观察法、透明胶纸粘取法、拔毛取样法、皮屑刮取法、黑背景检查法、解剖镜下通体检查法等，主要检查蚤、虱、螨等节肢动物。 * * 第三十八页，共六十九页。 2．体内寄生虫 主要检查蠕虫和原虫，可用直接涂片法(粪便、血液、脏器、肠内容物)、饱和盐水漂浮法或沉淀法、透明胶纸肛门周围粘取法、组织或器官剖面压印法、病变组织切片或压片法、尿液的离心法(如查鼠膀胱线虫)等。 实验动物的微生物、寄生虫检测具体操作方法详见《国家标准实验动物微生物学和寄生虫学的检测方法（啮齿类和兔类）》（GB/T14926.1-14926.41-200 1）。 * * 第三十九页，共六十九页。 三、监测要求 1．选定监测项目 任何一种实验动物都有许多致病性微生物、寄生虫，结合具体情况选择合适的检测项目，既达到保证动物质量的目的，又可节省人力物力。我国经过十多年来对各地实验动物感染病原微生物、寄生虫情况的调查，结合其他国家的规定和经验，制定了我国啮齿类和兔类微生物学、寄生虫学等级标准，猫、犬、猴等中型实验动物，卫生部医学实验动物管理委员会亦有初步规定。 * * 第四十页，共六十九页。 2．采样数量和频度 检测结果的准确性，要采取合适的动物数量。采样动物数可根据动物群体的污染程度而有所不同。 按照国家标准规定，动物数量超过100只的生产繁殖单元取样如下：普通级动物不能少于10只；清洁级动物检测5～10只；饲养于小隔离罩内的无菌动物和无特定病原体动物随机抽检2只；饲养于生产繁殖单元的抽检5～10只。 * * 第四十一页，共六十九页。 除了采样的数量，还必须考虑到检测的间隔时间。一般来说，