临床免疫分析发展趋势及化学发光技术应用.pptxVIP

临床免疫分析发展趋势及化学发光技术应用会计学第1页/共32页- 化学发光- 荧光偏振- 微粒子酶放大化学发光 电化学发光- 时间分辨免疫荧光 抗体芯片 透射和散射比浊 流式细胞技术- 免疫扩散- 免疫沉淀/免疫凝集- ELISA- IFA RIA ICT 免疫学和自动化技术在临床免疫学诊断领域中的应用将大大加速第2页/共32页标记免疫学分析技术发展历程免疫荧光分析(Coons, 1941)放射免疫分析(Berson和Yalow, 1960)酶联免疫吸附分析 (Engvall, 1971)金标免疫分析(Faulk和Taylor, 1971)化学发光免疫分析(Arakawa， 1977)时间分辨荧光免疫分析(Soini和Hemmila，1979)电化学发光免疫分析(Leland, 1990)化学发光免疫诊断技术（CLIA）酶联免疫诊断技术（ELISA）放射免疫诊断技术（RIA）20世纪60年代70年代80年代90年代2000年2020年 时间第3页/共32页近代临床免疫诊断技术发展历程临床免疫诊断技术的发展基本历经了以下三个阶段：第4页/共32页近代临床免疫诊断技术发展历程方法中国欧美放射免疫法（RIA）1.兴起于20世纪70年代，现仍普遍使用于县级以上医院；2.产品处于衰退期；3.厂商试剂与仪器共同开发，试剂基本系列化。 1.兴起于20世纪60年代，现已基本退出临床应用；2.产品生命周期已终结；3.厂商试剂和仪器共同开发，试剂基本系列化 酶联免疫法（ELISA）1.兴起于20世纪80年代，现普遍使用于各级临床机构，为我国临床免疫诊断的基本方法；2.产品处于成熟期；3.厂商试剂和仪器共同开发，试剂尚未系列化。 1.兴起于20世纪70年代，现仍在临床应用；2.产品处于衰退期；3.厂商试剂和仪器共同开发，试剂基本系列化。 化学发光免疫法（CLIA） 1.导入于20世纪90年代，逐步进入各大中医院；2.产品处于快速成长期；3.正逐步实现试剂和仪器共同开发，试剂逐步系列化 1.兴起于20世纪80年代，现已被临床普遍使用，成为临床免疫诊断的支柱方法；2.产品处于成熟期；3.厂商试剂与仪器共同开发，仪器自动化程度高，试剂系列化状态好。 第5页/共32页放射免疫技术（RIA）技术成熟度高放射性（125 I）污染和危害125 I 的半衰期短，试剂有效期短标记物125 I 的稳定性差，批间、批内的变异较大标准曲线有效期短，必须每次定标操作繁琐，出报告时间长无法保存备用。 Rosalyn Yalow, 1977第6页/共32页酶免疫分析技术 (EIA)成本低廉定性、半定量和定量均可以检测O.D值在低中浓度范围与酶活性呈线性关系可以肉眼简单判读或酶标仪准确判读结果第7页/共32页化学发光免疫分析（CLIA）灵敏度高，检测低限达10-19mol测定范围宽，可达9个数量级自动化程度高，操作简单试剂稳定性好，无污染有效期6－24月第8页/共32页BAYER ACS 180Elecsys 2010 SystemAxSYMAccess? 2 Immunoassay System第9页/共32页Elecsys 2010 System 电化学发光免疫测定（Electrochemiluminescence immunoassay, ECLI）是电化学发光（ECL）和免疫测定相结合的产物。 它的标记物的发光原理与一般的化学发光（CL）不同，是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应，实际上包括了电化学和化学发光二个过程。ECL与CL的差异在于ECL是电启动发光反应，而CL是通过化合物混合启动发光反应。最先进的免疫学分析技术之一非开放性试剂系统；试剂价格过高第10页/共32页免疫学检验技术发展趋势 阵列芯片 液相悬浮芯片集成高通量 化学发光 时间分辨荧光 AlphaScreen 精确灵敏快速简便 金标免疫层析检测 磁珠免疫层析检测第11页/共32页化学发光免疫分析技术及其在临床诊断中的应用第12页/共32页化学发光免疫分析发展史 CLIA 简史：本世纪70年代中期Arakawe首次报道用发光信号进行酶免疫分析，利用发光的化学反应分析超微量物质，特别是用于临床免疫分析中检验超微量活性物质。目前，这一技术已从实验室的稀有技术过渡到临床医学的常规检测手段。原理：发光底物在酶的作用下，底物发生化学反应并释放出大量的能量，产生激发态的中间体。这种激发态中间体，当其回到稳定的基态时，可同时发射出光子。利用发光信号测量仪器即可测量光量子产额，该光量子产额与催化的酶的量成正比,由此可以建立标准曲线并计算样品中待测物质的含量. CLIA试剂盒国产化程度已经较高，质量与国外产品的差距逐渐减小。缺乏国产化的自动检测仪器发光检测方法分类和对比第13页/共32页 类型 原理 试剂 发光