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课题2 土壤分解尿素的细菌的分离与计数
攀枝花市第15中学 胡枫苹;1、了解尿素
尿素分子式为CO(NH2)2,它是动物体内蛋白质代谢的产物,在肝脏中合成后,随尿液排出。
1828年,德国化学家维勒成功通过无机物的化学反应合成了尿素。此后,尿素走向工业化并广泛用于农业生产。; 农业生产中施加的尿素氮肥,如何被农作物吸收利用?
; 课题背景;原理; 土壤中细菌如此之多,该如何分离出能够分解尿素的细菌?
;一、科学家要提取耐高温(930C)的DNA聚合酶应去哪里找?; 如果要设计一个培养基能够筛选分解尿素的细菌的培养基。
1.培养基要提供哪些成分?
2.这些成分有什么作用呢?
3.如何对分解尿素的细菌进行计数,培养基的物理状态有没有要求呢?
4.如何鉴定分离出的细菌确实是分离尿素的细菌?
请同学们以小组为单位,设计能够筛选分解尿素细菌的培养基。
;2 实验室中微生物的筛选原理(22页);15.0g; ; 如何鉴定分离出的细菌确实是分离尿素的细菌(26页)?;如何对细菌进行计数?;2.活菌计数法;每克样品中的菌落数:(C÷V)×M
C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数
V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(ml)
M代表稀释倍数。;每克样品中的菌株数 =(C÷V)×M; 两位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数。从对应稀释倍数为106的培养基中,得到以下两种统计结果。
1、甲同学在该浓度下涂布了一个平板,统计的菌落数为230。
2、乙同学在该浓度下涂布了A、B、C三个平板,统计的菌落数分别为21、212、256,该同学以这三个平板上菌落数的平均值163作为统计结果。
哪位同学的值更接近真实值?如果有问题,错在哪?为什么会出现差距过大的情况呢?;注意事项
①当菌落数目稳定时,一般选择菌落数在30—300的平板上进行计数。
②为使结果接近真实值可将同一稀释度加到三个或三个以上的平板中,且这几个平板菌落数相近,才能计算平均数。
;(3)若在某次调查中,某一实验组平板上菌落平均数为36个/平板,而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落,这种结果说明在此次调查中出现了______现象。若将30(即36-6)个/平板作为本组菌落数的平均值,该做法_______(填“正确”或“不正确”)。;原理;课后思考
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