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挑战高考 【2017·全国Ⅰ(节选),37】某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用。回答下列问题:(1)有些细菌能分解尿素,有些细菌则不能,原因是前者能产生 。能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源,原因是 ,但可用葡萄糖作为碳源,进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是? (答出两点即可)?脲酶分解尿素的细菌是异养型生物,不能利用CO2来合成有机物为细胞生命活动提供能量,为其他有机物的合成提供原料尿素(2)为了筛选可分解尿素的细菌,在配制培养基时,应选择 (填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”)作为氮源,不选择其他两组的原因是 。?其他两组都含有NH4NO3,能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3,不能起到筛选作用复 习 课土壤中分解尿素的细菌的分离与计数四川省中江中学 周玲全国卷三年3考考 纲 解 读 最新考纲 细解考点 微生物的分离和培养(Ⅱ)通过尿素分解菌的分离实验掌握微生物的分离技术 某种微生物数量的测定(Ⅱ)通过尿素分解菌的计数方法理解微生物的计数方法培养基对微生物的选择作用(Ⅱ)高考指数 ★★★★★知 识 网 络有利于目的菌株生长抑制或阻止其他微生物生长人为条件筛选分解尿素的菌株统计菌落的数目稀释涂布平板法显微镜直接计数对照设置实验流程知 识 网 络(1)能合成脲酶的细菌才能分解尿素;(2)配制以尿素为唯一氮源的培养基,能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌实验原理土壤中分解尿素的细菌的分离与计数土壤取样→配制土壤溶液和制备培养基→系列稀释→涂布平板与培养→菌落计数 在培养基中加入酚红指示剂,若指示剂变红,pH升高,说明该细菌能分解尿素 鉴定方法【例1】分离土壤中分解尿素的细菌,对培养基的要求是( )①加尿素②不加尿素③加琼脂糖④不加琼脂糖 A. ①③⑤⑦ B. ②④⑥⑧ C. ①③⑤⑧ D. ①④⑥⑦⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦加硝酸盐⑧不加硝酸盐题型1:筛选分解尿素的菌株 C选择培养基:允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其它微生物生长的培养基。【变式】 甲、乙、丙是三种微生物,下表Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生长繁殖;甲能在I中正常生长繁殖,而乙和丙都不能;乙能在Ⅱ中正常生长繁殖,甲、丙都不能。下列说法正确的是( )DA.甲、乙、丙都是异养微生物 B.甲、乙都是自养微生物、丙是异养微生物C.甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是自养微生物D.甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物选择培养基:允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其它微生物生长的培养基。题型2:统计菌落数目(重点)显微镜直接计数法和间接计数法的比较显微镜直接计数法间接计数法(稀释涂布平板法)原理利用特定的血细胞计数板,在显微镜下计数一定体积的样品中微生物的数量公式当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌,通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少个活菌。每克样品中的菌株数=(C÷V)×MC代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)M代表稀释倍数显微镜直接计数法间接计数法(稀释涂布平板法)缺点结果当两个或多个菌体连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落。不能区分死菌与活菌比实际值偏高比实际值偏低【例2】国家饮用水标准规定,每升饮用水中大肠杆菌不超过3个。某小组欲通过实验来检测自来水中大肠杆菌的含量,已知大肠杆菌在伊红—美蓝培养基培养,大肠杆菌菌落呈黑紫色。请根据下列有关实验步骤回答问题:(1)接种:在如图的系列稀释操作中(101、102、103表示稀释倍数),依次将1mL液体移入下一个盛有 mL蒸馏水的试管中.过程a所用的接种方法为 。9释涂布平板法【例2】国家饮用水标准规定,每升饮用水中大肠杆菌不超过3个。某小组欲通过实验来检测自来水中大肠杆菌的含量,已知大肠杆菌在伊红—美蓝培养基培养,大肠杆菌菌落呈黑紫色。请根据下列有关实验步骤回答问题:(2)观察与计数:通过一段时间的培养,观察统计培养皿表面深紫色菌落的数目,结果如图所示,则每升自来水样本中含有大肠杆菌______个.3×107【例3】下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述,其中错误的是( )A. 用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板B. 取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL,分别涂布于各组平板上C. 将实验组和对照组平板倒置,37℃恒温培养24~48小时D. 确定对照组无菌后,选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数D提醒:样品稀释液的最佳浓度为获得每个平板上有30~300个
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