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小鼠四诊指标观测方法
方肇勤 潘志强 卢文丽
(2006-11-27)
一、目的要求
掌握对实验动物模型的证候表现进行四诊观察、测定的方法。
二、实验材料
实验动物:昆明种小鼠,雄性。
实验设备或仪器:
SQF-EA 体视显微镜,以及自制显微镜与数码相机接口;
NIKON Coolpix4500 数码相机;
自制光源装置:3200K-250W 摄像专用光源。采用摄像专用的反射罩
(直径约 20cm,内面为粗糙的银白色反射涂料)将光源聚焦至显微镜的视野内;
自制小鼠自然状态下心电快速采集装置,及 XD-7100 单道心电图机;
数字 WMY-01 型温度计;
MP200B 型电子天平或 ACS-6A 型计价电子秤;
YLS-13A 大小鼠抓力测量仪;
相机三脚架,划有小方格(5cm×4cm)的透明薄膜纸(26cm×16cm)及改造的小鼠移动笼具。
三、实验步骤
可定量化指标
饮水、摄食量:
每只日摄食量=(上次加入的饲料量-剩余量)/(小鼠只数 × 间隔日数)。每只日饮水量=(上次加入的饮水量-剩余量)/(小鼠只数 × 间隔日数)。
体重:电子天平测量。
腋温:打开温度计开关,检查状态完好后,先随机测量 2 只小鼠的温度,但不作记录,此为预热。接着进入正式测量,左手抓住小鼠,暴露腹部,右手持温度计,后插入小鼠左腋下,以温度计上的数值上升到不再上升为止,即可以读出相应的腋温数值。
爪和尾显微放大拍照和图像处理获取 r 值
第一步:将小鼠左后爪(尾)分别放在载物台上,爪面向上,使每只小鼠左后爪(尾)的方向一致,调整显微镜的微调按钮,使之放大倍数为 8 倍,手动模式
(M),曝光模式:尾 -M(1/30,F4.5),爪-M(1/30,F4.5), ISO:400 下拍摄。将拍摄后的照片输入电脑。
第二步:采用 Photoshop7.0 图像软件进行处理,选取爪的掌部及尾部作为RGB 色度的定量分析。作为国际标准色的定量,R 代表红色,G 代表绿色,B 代表蓝色,得到原始爪尾 RGB 分量值。将 RGB 值带入公式 r=R/(R+G+B),得出 r 值。能反映红色程度的深浅。
心率:采用自制的心电图采集装置进行检测,心电图机设置:交流电
(AC),肌电抑制(EMG)、交流电干扰抑制( HUM),纸速为 50mm/s,定标为 1mv,灵敏度为 2mv,人工计算心率。
小鼠抓力测量:接通电源,按动测定键,测定灯亮,将小鼠轻轻放在抓力板上,抓住鼠尾轻轻向后牵拉,待动物抓牢抓力板后,致使动物松爪,这时仪器会自动记录下动物的最大抓力,并伴有音响提示,然后将结果输入电脑或直接打 印。
小鼠晚间旷场活动录像
将数码相机固定在三脚架上,位于观察笼正上方。打开相机电源至录像模式, 将鼠笼置于地面,垂直于数码相机下方。将小鼠从饲养笼中转移到洁净透明的小鼠饲养笼内,饲养笼底部垫划有小方格的透明薄膜纸。待小鼠适应新环境后,用数码相机拍摄小鼠 35 秒录像。输入电脑后,可反复播放,并逐一记录 35 秒内不同小鼠水平移动格数、前肢离地直立数。能反映晚间动物自主活动状况。
以上指标检测时,要求小组成员(一般 4-6 人/组)密切配合,可提高效率,
节省时间。
非定量化指标-一般四诊表现
一般四诊表现及分类
问诊:日期、品系、月龄、性别、饲养、繁殖、致病因素、治疗经过闻诊:a 笼内垫料无异味,b 骚臭,c 恶臭
望形体神:a 倦怠,b 拱背,c 精神萎靡,d 呼吸微弱,e 朦胧欲睡,f 嗜卧,g 多怒撕咬
望形体寒热:a 蜷缩,b 扎堆,c 畏寒喜暖,d 拱背,e 发抖
望运动步态:a 活动减少,b 步态不稳,c 行动呆滞,d 反应迟钝,e 筋脉拘挛、抽挚
望形体虚实:a 发育不良,b 消瘦,c 羸瘦
望毛色虚实:a 无光泽,b 竖立,c 皮毛蓬松,d 枯黄,e 稀少望呼吸状况:a 气喘,b 喘急,c 呼吸微弱
望眼神:a 眼裂变窄,b 眼眯,c 闭目,d 眼中无神,e 瞳孔异常,f 目疾望耳:a 色淡,b 暗红
望鼻:a 多涕,b 挠鼻,c 鼻孔血痕
望唇:a 色淡,b 淡红,c 红,d 暗红,e 青紫,f 消瘦,g 不洁,h 晦暗望腹:a 胀满
望二阴:a 肛门红肿充血,b 脱垂,c 污秽
望大便:a 偏湿,b 湿烂,c 粘液便,d 腹泻,e 便溏望小便:a 色赤,b 量多
望爪:a 瘦瘪、b 肿胀;c 淡、d 红、e 暗;f 少光泽、g 无光泽;h 肮脏;i 蜷缩望尾:a 瘦瘪、b 肿胀;c 淡、d 红、e 暗;f 少光泽、g 无光泽;h 肮脏;i 垂尾切诊:a 爪尾温、b 爪尾凉;c 肌力弱、d 肌力强
以上内容可记录于一般四诊表现及辨证记录表格中,如下表 1:
小鼠一般四诊表现和辨证记录
表 1 小鼠一般四诊表现和辨证记录
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