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1.(2010·天津理综,7Ⅰ)下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中 tetR 表示四环素抗性基因,ampR 表示氨苄青霉素抗性基因,BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。
据图回答问题。
图中将人乳铁蛋白基因插入载体,需用 限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含 的培养基上进行。
能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是 (填字母代号)。A.启动子 B.tetR C.复制原点 D.ampR
过程①可采用的操作方法是 (填字母代号)。A.农杆菌转化 B.大肠杆菌转化
C.显微注射 D.细胞融合
过程②采用的生物技术是 。
对早期胚胎进行切割,经过程②可获得多个新个体。这利用了细胞的 性。(6)为检测人乳铁蛋白是否成功表达,可采用 (填字母代号)技术。 A.核酸分子杂交 B.基因序列分析
C.抗原—抗体杂交 D.PCR
2.(2009·上海卷)人体细胞内含有抑制癌症发生的P53 基因,生物技术可对此类基因的变化进行检测。
目的基因的获取方法通常包括 和 。
上图表示从正常人和患者体内获取的P53 基因的部分区域。与正常人相比,患者在该区域的碱基会发生改变,在上图中用方框圈出发生改变的碱基对,这种变异被称为 。
已知限制酶E 识别序列为CCGG,若用限制酶 E 分别完全切割正常人和患者的P53 基因部分区域(见上图),那么正常人的会被切成 个片段,而患者的则被切割成长度为 对碱基和
对碱基的两种片段。
如果某人的P53 基因部分区域经限制酶E 完全切割后,共出现170、220、290 和 460 个碱基对的四种片段,那么该人的基因型是 (以P+表示正常基因,P-表示异常基因)。
3.(2009·福建卷)转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有 PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。请回答下列问题。
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构建含抗病基因的表达载体A 时,应选用限制酶 ,对 进行切割。
培养板中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长,欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞,应使基因表达载体A 中含有 ,作为标记基因。
香蕉组织细胞具有 ,因此,可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中①、②依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的 。
4(2011 年安徽卷).(21 分)Ⅱ.(9 分)家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养,可以提取干扰素用于制药。
进行转基因操作前,需用 酶短时处理幼蚕组织,以便获得单个细胞。
为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达,需要把来自 cDNA 文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的 和 之间。
采用 PCR 技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。改 PCR 反应体系的主要成分应该包含: 扩增缓冲液(含 Mg2+)、水,4 种脱氧核糖苷酸、模板 DNA、 和 。 (4)利用生物反应器培养家蚕细胞时,的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中,这样可以 增加培养的细胞数量,也有利于空气交换。
5(11 年山东卷).(8 分)【生物—现代生物科技专题】
人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选。利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如图所示。
卵母细胞除从活体输卵管中采集外,还可以从处死的雌鼠 中获取。
图中的高血压相关基因作为 ,质粒作为 ,二者需用 切割后连接成重组载体,该过程与质粒上含有 有关。
子代大鼠如果 和 ,即可分别在水平上说明高血压相关基因已成功表达, 然后可用其建立高血压转基因动物模型。
在上述转基因大鼠的培育过程中,所用到的主要胚胎工程技术是 、早期胚胎培养和胚胎移植。
6.(2011·江苏卷,33)请回答基因工程方面的有关问题。
利用 PCR 技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA 复制类似(如图所示)。图中引物为单链 DNA
片段,它是子链合成延伸的基础。
①从理论上推测,第四轮循环产物中含有引物A 的DNA 片段所占的比例为 。
②在第 轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA 片段。
设计引物是 PCR 技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)都不合理(如下图),请分别说明理由。
①第 1 组: ;
②第 2 组: 。
PCR 反应体系中含有热稳定DNA 聚合酶,下面的表达式不能正确反映DNA 聚合酶的功能,这是因为
。
用限制酶 EcoRⅤ、MboⅠ单独或联合切割同一种质粒,得到的DNA
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