DNA复制,修复和重组.pptVIP

第二节 DNA修复（repair） 一. 关于突变的一些概念 1. 天然突变和诱变 天然突变：如碱基的互变异构，宇宙线造成的突变。天然突变率称突变的本底水平（background）。 诱导突变（induced mutation）：补加诱变剂诱发的突变。 诱变剂：引起突变的任何物理因子或化学因子称诱变剂或诱变因子。 第三十页，共七十五页。 第三十一页，共七十五页。 一些生物学过程也引起突变，如病毒的感染（在染色体上的整合等）。 2. 突变的分类 点突变：用一个碱基对替换另一个碱基对的突变。 插入（insertion）和缺失（deletion）：插入和缺失都可以造成基因的框移突变（frame shift mutation）。 无意义突变（nonsense mutation）：有意义密码改变成终止密码的突变。 第三十二页，共七十五页。 第三十三页，共七十五页。 3. 点突变的渗漏性 a. 沉默突变（silent mutation） 突变不改变氨基酸残基，CUX对应Leu，CCX对应Pro； 改变氨基酸残基但不影响基因产物的活性，如Phe Tyr，Leu Ile； 正向突变 灭活一个基因的突变称正向突变（forward mutation）。 突变的回复 第三十四页，共七十五页。 能克服原始突变造成的影响的第二次突变称回复突变（reversion mutation） 真回复 true reversion 第二点回复：回复突变发生在同一基因内的第二个位点。 4. 突变的抑制作用（suppression） a.基因内抑制（或基因内回复，intragenic reversion），指一个补偿突变恢复了原突变蛋白的活性构象；或在一个框移突变之后恢复正确的读码框架。 第三十五页，共七十五页。 第三十六页，共七十五页。 b. 突变的基因间回复（或基因间的抑制） 第二个基因的突变排除或抑制了第一个基因突变的影响，如抑制子tRNA抑制无意义突变和错义突变。 二. 肿瘤发生和Ames检测 DNA核苷酸顺序的永久性改变称为突变，突变的积累导致动物肿瘤的发生。一般的说诱变剂是致癌物。Ames检测法检出致癌物：利用一株 沙门氏杆菌组氨酸合成酶缺陷株。诱变剂（致癌物）可导致基因突变的回复，使之成为野生型，这原理可用检出诱变剂。 第三十七页，共七十五页。 第三十八页，共七十五页。 第三十九页，共七十五页。 三. 细胞中的DNA修复系统 细胞有多个DNA修复系统，为遗传信息的完整性不惜代价。DNA修复的主要根据是以正确的互补链修复损伤的或错误的链。 1. 错配修复（mismatch repair） a. DNA复制后错配碱基在模板链指导下的修复过程称错配修复，可提高复制精确率102-103倍； b. 区分模板链和新合成链依靠识别亲本 第四十页，共七十五页。 第四十一页，共七十五页。 链中GATC序列中的甲基化标签（tag）； c. Dam 甲基化酶甲基化DNA（A碱基的N6甲基化）； d. 错配修复所需的酶类 Dam 甲基化酶；Mut H，Mut L，Mut S蛋白；DNA helicase II；SSB；DNA polymeras III；exonuclease I；外切酶VII；Rec J 核酸酶；DNA ligase。 e. 修复过程图解 第四十二页，共七十五页。 第四十三页，共七十五页。 2. 碱基的切割修复 主要酶类：核酸糖基化酶（glycosylase），AP内切核酸酶，DNA polymerase I，DNA ligase 核酸糖基化酶识别损伤碱基，切割损伤碱基产生AP位点，由AP内切核酸酶切割AP位点的磷酸二酯键。 3. 核苷酸切割修复 由uvr A，uvr B，uvr C编码的“ABC切割核酸酶”，ABC excinuclease切去碱基光促合成产物，切去损伤点上游8nt，下游4-5nt。 第四十四页，共七十五页。 第四十五页，共七十五页。 第四十六页，共七十五页。 4. 直接修复（direct repair） a. 光复活修复 DNA光解酶（photolyase） b. O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶去甲基化 第四十七页，共七十五页。 第四十八页，共七十五页。 5. 差错倾向修复（error-prone repair）SOS反应 a. SOS反应 当细胞DNA受到大量的严重的损伤时，诱发细胞的应急反应（SOS respone）。此时细胞诱导产生大